孕鼠補(bǔ)充?；撬嵴{(diào)節(jié)生長受限胎鼠腦組織miRNA表達(dá)初步探討.pdf

1、研究背景:
　　本項(xiàng)目組前期研究結(jié)果表明，宮內(nèi)生長受限(Intrauterine growth restriction，IUGR)可對足月兒腦功能發(fā)育造成嚴(yán)重不良影響，但是否影響早產(chǎn)兒腦功能發(fā)育尚不明確。為此，本研究在國家自然科學(xué)基金（項(xiàng)目編號:81471087）的資助下，采用振幅整合腦電圖(Amplitude integrated electroencephalogram，aEEG)對宮內(nèi)生長受限早產(chǎn)兒腦功能進(jìn)行了觀察;并在此基

2、礎(chǔ)上研究孕鼠補(bǔ)充牛磺酸對生長受限胎鼠腦組織miRNA表達(dá)的影響，為產(chǎn)前補(bǔ)充牛磺酸促進(jìn)生長受限胎兒腦功能發(fā)育提供一定理論依據(jù)。
　　第一部分 宮內(nèi)生長受限對早產(chǎn)兒腦功能發(fā)育的不良影響
　　目的:探討宮內(nèi)生長受限(intrauterine growth restriction，IUGR)對早產(chǎn)兒腦功能發(fā)育的影響。
　　方法:采用NicoletOne腦功能監(jiān)護(hù)儀對2015年1月至2016年2月在陸軍區(qū)總醫(yī)院附屬八一兒童醫(yī)院新

3、生兒科住院、胎齡32周～36+6周的早產(chǎn)兒于生后72h內(nèi)進(jìn)行監(jiān)測，每次連續(xù)監(jiān)測4～6h。共收集110例，其中小于胎齡兒(small for gestational，SGA)50例和適于胎齡兒(appropriate for gestational age，AGA)60例，比較2組早產(chǎn)兒腦電波形的連續(xù)性、睡眠-覺醒周期(sleep wake cycling，SWC)、爆發(fā)間期(interburst interval，IBI)、最低和最高電

4、壓等指標(biāo)的差異。采用卡方檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)和方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　結(jié)果:早產(chǎn)兒連續(xù)性腦電圖及睡眠-覺醒周期的出現(xiàn)率均為SGA組小于AGA組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.002）;爆發(fā)間期SGA組＞AGA組(p=0.000)，最高電壓及最低電壓均為SGA組＜AGA組（=0.002），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。SGA組低出生體重程度如小于同胎齡第3百分位者、第3～5百分位和第5～10百分位小于胎齡兒之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞

5、0.05)。SGA組中單純低血糖組（低血糖患兒的選取標(biāo)準(zhǔn)是:小于2.2mmol/L，且無腦病者）及正常血糖組之間aEEG差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)，單純高膽紅素組（高膽紅素患兒的選取標(biāo)準(zhǔn)是:血中膽紅素值大于171μmol/L、且無腦病者）及正常血膽紅素組之間aEEG差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　結(jié)論:SGA患兒aEEG連續(xù)性及周期性出現(xiàn)率減少，爆發(fā)間期相對延長，最高及最低電壓降低，一定程度上延遲或抑制了早產(chǎn)兒腦功能

6、發(fā)育。
　　第二部分 孕鼠補(bǔ)充?；撬嵴{(diào)節(jié)生長受限胎鼠腦組織miRNA表達(dá)初步探討
　　目的:觀察宮內(nèi)生長受限胎鼠及產(chǎn)前補(bǔ)充?；撬岷笊L受限胎鼠腦組織內(nèi)小RNA(miRNA)的差異表達(dá)，從基因?qū)用孢M(jìn)一步探討與宮內(nèi)生長受限腦損傷相關(guān)miRNA，以及產(chǎn)前補(bǔ)充牛磺酸對生長受限胎鼠腦組織相關(guān)miRNA的表達(dá)的影響。
　　方法:選取24只健康Sprague-Dawley孕鼠，隨機(jī)分為3組:對照組，F(xiàn)GR組，?；撬峤M，每組8只孕鼠，

7、依據(jù)全程饑餓法制作FGR模型。通過microRNA PCR芯片檢測技(包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(RT-PCR)在內(nèi)）篩選出FGR組及?；撬峤M胎鼠腦組織中表達(dá)差異的miRNA。
　　結(jié)果:在FGR組和?；撬峤M中，篩選出多個差異性表達(dá)的miRNA。通過?；撬峤M與對照組比較，有18個差異性表達(dá)的miRNAs，其中有5個具有顯著性的異(p＜0.05):mmu-mir-714,miR-135b,let-7b,miR-325,miR-148a

8、*。通過IUGR組與對照組比較，有35個差異性表達(dá)的miRNAs，其中12個具有顯著性的差異(p＜0.05):miR-223,mir-875-3p,mir-299*,miR-450a-5p,mmu-mir-714,miR-135b,mir-491,miR-302b,miR-325,miR-26b,miR-340-3p,miR-208b。通過?；撬峤M與IUGR組比較，有16個差異性表達(dá)的miRNAs，其中有3個具有顯著性的差異(p＜0.0

9、5):miR-223，miR-30c，mir-211。根據(jù)牛磺酸組、對照組及IUCR組miRNA基因表達(dá)水平差異的變化，發(fā)現(xiàn)3組中miR-223的表達(dá)水平差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的（P＜0.05):?；撬峤M＞對照組＞宮內(nèi)生長受限組。
　　結(jié)論:根據(jù)上述結(jié)果推測mir-875-3p，mir-299*，miR-450a-5p，mmu-mir-714,miR-135b,mir-491,miR-302b,miR-325,miR-26b,mi