脾動(dòng)脈結(jié)扎對(duì)肝部分切除術(shù)后大鼠肝再生的影響.pdf

1、目的:
　　肝癌是我國(guó)常見的惡性腫瘤之一。在治療肝臟惡性腫瘤時(shí)，外科醫(yī)生經(jīng)常面臨著腫瘤根治性切除和保全殘肝功能的兩難境地。這種顧慮往往使外科醫(yī)生放棄了腫瘤的根治性切除。因此如何提高肝臟部分切除術(shù)后肝再生能力成為亟待解決的問(wèn)題。有研究表明脾切除術(shù)促進(jìn)了肝部分切除術(shù)后大鼠的肝再生。與脾切除相比較，脾動(dòng)脈結(jié)扎也可以在一定程度上減少門靜脈的血流來(lái)源，降低門靜脈壓力，緩解肝大部切除后門脈高灌注狀態(tài)，而且手術(shù)操作簡(jiǎn)單易行、切口相對(duì)較小，相對(duì)縮

2、短了手術(shù)時(shí)間，減少了術(shù)中出血，降低了手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)又保留了脾臟的免疫功能、清除功能等。但脾動(dòng)脈結(jié)扎對(duì)肝再生的影響及機(jī)制仍不明確。本課題通過(guò)建立Sprague-Dawley大鼠70％肝切除模型，觀察脾動(dòng)脈結(jié)扎對(duì)部分肝切除大鼠術(shù)后肝臟功能恢復(fù)及肝臟再生過(guò)程中肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor, HGF）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-α(transforming growth factoralpha, TGF-α)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因

3、子-β1（transforming growth factor beta1，TGF-β1）表達(dá)的影響，探討脾動(dòng)脈結(jié)扎對(duì)肝再生的影響。
　　材料與方法:
　　在實(shí)驗(yàn)前期，通過(guò)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)建立穩(wěn)定的大鼠70％肝切除模型。在此基礎(chǔ)上，將72只健康雄性Sprague-Dawley大鼠（河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)買），鼠齡6-8周，體重220～250 g，隨機(jī)分為3組，假手術(shù)組（A組）:開腹后僅行肝左葉、肝中葉分離及距脾門1.5 cm分離脾動(dòng)

4、靜脈;70％肝切除組（B組）:完整切除大鼠肝左葉及肝中葉;70％肝切除+脾動(dòng)脈結(jié)扎組（C組）:完成肝左葉和肝中葉的切除后，距脾門1.5 cm，結(jié)扎脾動(dòng)脈。每組再分為3個(gè)階段:術(shù)后24h、術(shù)后48 h、術(shù)后72 h，稱重，麻醉后開腹留取腹主動(dòng)脈血及取肝臟標(biāo)本。記錄麻醉前大鼠重量，測(cè)殘肝的濕重，計(jì)算大鼠肝體比;所取腹主動(dòng)脈血，一部分送檢驗(yàn)科測(cè)定肝功能生化指標(biāo)ALT和AST水平，另一部分靜置后離心取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme-l

5、inked immunosorbent diffusion assay, ELISA）檢測(cè)血清中HGF、TGF-α和TGF-β1的水平;所取肝臟組織多聚甲醛固定，采用免疫組織化學(xué)方法分別檢測(cè)肝組織中TGF-α和TGF-β1的表達(dá)。應(yīng)用SPSS21.0軟件統(tǒng)計(jì)分析各組間各個(gè)指標(biāo)的差異，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　成功建立了SD大鼠70％肝切模型，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中大鼠能正常存活。術(shù)后B組、C組肝體比隨時(shí)間變化

6、逐漸增加。與B組比較，C組術(shù)后24 h肝體比較小(P＜0.05)，術(shù)后48h肝體比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，術(shù)后72h肝體比增大(P＜0.05)。與A組比較，B組、C組術(shù)后24、48和72 h血清ALT、AST水平均明顯增高(P＜0.05);B組、C組術(shù)后血清ALT、AST水平均隨時(shí)間的變化逐漸降低，C組術(shù)后24、48和72h血清ALT、AST水平均低于術(shù)后同時(shí)間B組(P＜0.05)。與A組比較，術(shù)后24、48和72 h血清TG

7、F-α水平和肝組織中TGF-α的表達(dá)水平在B組和C組均明顯升高(P＜0.05）。與B組比較，C組術(shù)后24 h血清中TGF-α水平和肝組織中TGF-α的表達(dá)水平均增高(P＜0.05），在術(shù)后48、72 h血清中TGF-α水平和肝組織中TGF-α的表達(dá)水平與C組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05）。與A組比較，B組和C組大鼠在術(shù)后24、48和72 h肝組織中TGF-β1表達(dá)量明顯增加(P＜0.05);與B組比較，C組大鼠在術(shù)后24、48和72

8、h肝組織中TGF-β1表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。B組大鼠術(shù)后24、48和72 h血清中TGF-β1水平均高于C組大鼠(P＜0.05)。B組和C組術(shù)后24、48和72 h血清中HGF水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.脾動(dòng)脈結(jié)扎可以減輕70％肝切除大鼠術(shù)后肝組織損傷，提高殘肝質(zhì)量增加的速度，促進(jìn)肝臟功能的恢復(fù);
　　2.結(jié)扎脾動(dòng)脈可促進(jìn)70％肝切除大鼠術(shù)后24 h TGF-α的表達(dá)，