泮托拉唑緩解腫瘤惡病質(zhì)骨骼肌消耗及其機(jī)制.pdf

1、目的：
　　本實(shí)驗(yàn)通過建立腫瘤惡病質(zhì)小鼠模型，研究泮托拉唑?qū)翰≠|(zhì)狀態(tài)下的骨骼肌消耗的保護(hù)作用及其可能的相關(guān)機(jī)制，為惡病質(zhì)的進(jìn)一步研究提供新的思路，并為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　48只雄性BALB/c小鼠，按照隨機(jī)數(shù)字表分為6個組，每組8只，分別為：正常對照組（NC）、惡病質(zhì)組（CC）、低濃度治療組（CL）、中濃度治療組（CM）、高濃度治療組（CH）、生理鹽水組（CS）。荷瘤小鼠于右前肢腋下接種小鼠結(jié)腸腺

2、癌細(xì)胞c26，以建立小鼠腫瘤惡病質(zhì)模型；正常對照組于相同部位注射等量的PBS緩沖液。每日監(jiān)測小鼠的體重、腫瘤的大小以及各組小鼠的自發(fā)活動。待接種腫瘤細(xì)胞的小鼠進(jìn)入到惡病質(zhì)狀態(tài)后，治療組采用不同濃度的泮托拉唑灌胃，生理鹽水組采用等量生理鹽水灌胃，NC組和CC組不作任何干預(yù)。待藥物治療2周后，收集標(biāo)本檢測相關(guān)指標(biāo)。ELISA法檢測血清IL-6及TNF-α水平。Real-time PCR檢測腓腸肌JAK2及STAT3 mRNA表達(dá)情況；Wes

3、tern blot檢測腓腸肌p-JAK2，p-STAT3，F(xiàn)bx32和MuRF1蛋白表達(dá)情況。免疫組化法檢測腓腸肌組織中Fbx32和MuRF1的表達(dá)。HE染色觀察腓腸肌形態(tài)變化。采用SPSS17.0軟件分析數(shù)據(jù)。
　　結(jié)果：
　　1.腫瘤惡病質(zhì)模型成功建立荷瘤小鼠在接種腫瘤細(xì)胞后第5天，皮下可觸及腫瘤結(jié)節(jié)生長；接種后第12天，荷瘤小鼠腫瘤明顯增大，體重較正常對照組明顯下降（P＜0.05），并且出現(xiàn)了自發(fā)性活動減少(P＜0.0

4、5)、毛發(fā)暗淡無光、精神虛弱等癥狀，提示荷瘤小鼠進(jìn)入惡病質(zhì)狀態(tài)。
　　2.小鼠體質(zhì)量及腓腸肌變化接種腫瘤細(xì)胞后第5天，荷瘤小鼠皮下可觸及腫瘤結(jié)節(jié)，但各組小鼠體重?zé)o差異（P＞0.05）；接種c26細(xì)胞后第12天，荷瘤小鼠較正常組體重明顯減輕（P＜0.05）；在泮托拉唑干預(yù)2周后，治療組小鼠較生理鹽水組體重有不同程度增加，且高濃度組小鼠體重增加最為明顯（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，治療組小鼠較生理鹽水組腓腸肌重量及橫切面積均有不同程度

5、增加，且高濃度組小鼠體重增加最為明顯（P＜0.05）；高濃度組小鼠的腫瘤重量較生理鹽水組也有明顯減輕（P＜0.05）。
　　3.小鼠血清中炎性因子水平變化與正常對照組相比，血清炎性因子IL-6和TNF-α水平在惡病質(zhì)小鼠中顯著升高（P＜0.05）。在使用泮托拉唑干預(yù)后，各濃度組較生理鹽水組血清炎性因子都有不同程度降低，尤其高濃度組降低得最為顯著（P＜0.05）。
　　4.小鼠炎性通路JAK2/STAT3表達(dá)變化與正常對照組相

6、比，炎性通路JAK2和STAT3的mRNA表達(dá)水平在惡病質(zhì)小鼠中顯著升高（P＜0.05），并且p-JAK2和p-STAT3的蛋白表達(dá)水平在惡病質(zhì)小鼠中也明顯增高（P＜0.05）。在使用泮托拉唑干預(yù)后，各濃度治療組同生理鹽水組比較，JAK2和STAT3的mRNA表達(dá)水平以及p-JAK2和p-STAT3的蛋白表達(dá)水平都有不同程度降低，尤其以高濃度組降低最為顯著（P＜0.05）。
　　5.小鼠骨骼肌泛素蛋白酶體系統(tǒng)變化與正常對照組比較，

7、惡病質(zhì)組小鼠腓腸肌中的MuRF1和Fbx32的蛋白表達(dá)水平明顯升高（P＜0.05），而泮托拉唑干預(yù)后，不同濃度干預(yù)組小鼠的MuRF1和Fbx32的蛋白表達(dá)水平較生理鹽水組均降低，且高濃度組降低最為明顯（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　小鼠C26細(xì)胞接種于BALB/c小鼠成功建立腫瘤惡病質(zhì)模型。
　　泮托拉唑能明顯改善腫瘤惡病質(zhì)一般情況，增加體質(zhì)量，緩解骨骼肌萎縮，抑制腫瘤生長，并且高濃度泮托拉唑具有更好的保護(hù)作用。<