津力達(dá)顆粒對糖尿病大鼠骨骼肌的保護(hù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、第三部分二甲雙胍對L6胰島素抵抗細(xì)胞SIRT3表達(dá)的影響及機(jī)制探討
　　 目的:研究SIRT3在L6大鼠骨骼肌細(xì)胞胰島素抵抗中的作用，探討二甲雙胍改善骨骼肌胰島素抵抗可能的信號通路。
　　 方法:建立棕櫚酸(PA)誘導(dǎo)的大鼠L6肌細(xì)胞胰島素抵抗模型，在L6正常細(xì)胞及L6胰島素抵抗細(xì)胞中過表達(dá)和干擾SIRT3基因?？捡R斯亮藍(lán)染色觀察L6細(xì)胞出現(xiàn)肌管結(jié)構(gòu)情況，葡萄糖氧化酶-過氧化酶法檢測細(xì)胞上清中葡萄糖濃度，利用熒光探針DC

2、FH-DA檢測ROS水平。用Western blot檢測蛋白質(zhì)SIRT3、NF-κB、JNK1及SOD2表達(dá)水平的變化。
　　 結(jié)果:與L6正常細(xì)胞相比L6胰島素抵抗細(xì)胞中葡萄糖吸收率降低，而ROS生成增多;過表達(dá)SIRT3后，L6細(xì)胞對葡萄糖的吸收率升高，ROS生成減少，相反，干擾時，L6細(xì)胞對葡萄糖的吸收率降低，ROS生成增多;二甲雙胍能使L6細(xì)胞SIRT3和SOD2表達(dá)增加，同時NF-κBP65和JNK1表達(dá)降低，葡萄糖吸