幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎(JIA)維生素D狀態(tài)、關(guān)節(jié)炎小鼠T細(xì)胞免疫機(jī)制探討及生物制劑治療JIA有效性觀察.pdf

1、第一部分：幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎疾病活動度與血清維生素D水平相關(guān)性分析
　　目的：通過檢測幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎（JIA）患兒血清25(OH)D3水平，研究患兒體內(nèi)維生素D狀態(tài)及與JIA疾病活動度的關(guān)系。
　　方法：按2001年 ILAR診斷標(biāo)準(zhǔn)納入110名JIA患兒（男性52例，女性58例，年齡范圍3.02-16.60歲，平均年齡9.04±3.37歲，）參與評估，采用高效液相色譜法檢測JIA患兒血清25(OH)D3、血漿PTH水平，腰

2、椎DXA掃描評估骨密度。根據(jù)2011年ACR標(biāo)準(zhǔn)評價患兒疾病活動狀態(tài)（活動期、緩解期），并通過JADAS27評分衡量疾病活動度。比較不同類型及狀態(tài)下JIA患兒血清25(OH)D3水平及其與其他指標(biāo)之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：110例JIA患兒血清25(OH)D3平均水平19.9±6.1ng/ml，其中59例（53.6%）為維生素D缺乏狀態(tài)，43例（39.1%）表現(xiàn)為維生素D不足，8例（5.6%）維生素D充足?；顒悠诨純?5(OH)D3

3、水平低于緩解期（P＜0.001），與JADAS27評分無相關(guān)性(P＞0.05)。維生素D缺乏狀態(tài)下JIA患兒骨密度低于維生素充足狀態(tài)(P＜0.001)，使用皮質(zhì)激素（GC）治療JIA患兒25(OH)D3水平顯著低于未使用GC治療患兒（P＜0.001）。
　　結(jié)論：JIA患兒普遍存在維生素D水平低下，尤其是起病早，疾病活動度高，以及使用激素治療的患兒維生素 D水平低下且骨量降低顯著。維生素D水平在JIA各亞型中無顯著性差異。

4、　　第二部分：不同品系實驗小鼠關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建及IP-10致Th17/Treg失衡在CIA發(fā)病中的作用
　　目的：比較不同品系實驗小鼠關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建成功率，探討 IP-10及其受體致Th17/Treg失衡在膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（CIA）小鼠發(fā)病中的作用。
　　方法：選擇不同日齡DBA1小鼠、C57/B6小鼠、IL-17基因敲除小鼠各16只，隨機(jī)分為實驗組及對照組各8只，將牛Ⅱ型膠原與完全弗氏佐劑按1:1充分混和乳化，于各型實驗組小鼠

5、尾根部皮內(nèi)分別注射100ul/只進(jìn)行初次免疫，21d后同樣方法進(jìn)行再次免疫；同品系對照組小鼠各8只，尾根部皮下注射等量的 PBS并進(jìn)行關(guān)節(jié)炎評分，觀察關(guān)節(jié)炎發(fā)生率。第二次免疫后42天分別處死小鼠，分離脾細(xì)胞，采用流式細(xì)胞計數(shù)檢測兩組小鼠脾細(xì)胞中IP-10受體CD183+Th17及Treg的細(xì)胞比例。
　　結(jié)果：實驗組中7只 DBA1小鼠出現(xiàn)不同程度關(guān)節(jié)紅腫，活動度減少（7/8，87.5%），4只C57/B6小鼠出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥狀（4/

6、8，50.0%），IL-17基因敲除小鼠無一發(fā)生關(guān)節(jié)炎癥（0/8，0%），對照組無一例發(fā)生關(guān)節(jié)炎癥改變。在第二次免疫后2周、3周，采用關(guān)節(jié)炎指數(shù)(AI)評定兩次取平均值作為該小鼠的AI值，記錄各品系小鼠關(guān)節(jié)炎發(fā)病程度，結(jié)果顯示DBA1小鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)顯著高于C57/B6小鼠（均值2.0&0.6）。CIA組小鼠脾細(xì)胞中CD183+Th17細(xì)胞增高而CD183+Treg細(xì)胞比例顯著下降，與對照組相比有明顯差異。
　　結(jié)論：牛Ⅱ型膠原誘導(dǎo)

7、關(guān)節(jié)炎（CIA）造模成功率與小鼠品系選擇密切相關(guān)，其中DBA1小鼠造模成功率最高，IL-17基因敲除小鼠造模不成功，證實IL-17在關(guān)節(jié)炎發(fā)病中可能起到重要作用。趨化因子IP-10可能通過其受體CXCR3（表達(dá)CD183+）在Treg、Th17細(xì)胞上的表達(dá)致Treg/Th17失衡，可能是導(dǎo)致或加重CIA發(fā)病的重要原因。
　　第三部分托珠單抗治療難治性全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎療效及安全性觀察
　　目的：觀察托珠單抗治療難治性全身

8、型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎（sJIA）的療效及不良反應(yīng)。
　　方法：比較托珠單抗和糖皮質(zhì)激素在難治性全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎中的療效和不良反應(yīng)。使用幼年關(guān)節(jié)炎疾病活動評分27(JADAS27)方法于治療第6、12和24周評價疾病活動度和安全性。
　　結(jié)果：共納入60例難治性sJIA患者，36例接受托珠單抗聯(lián)合非甾體抗炎藥和（或）糖皮質(zhì)激素，24例接受糖皮質(zhì)激素聯(lián)合非甾體抗炎藥治療。托珠單抗采用靜脈滴注，每2周一次，隨訪時間24周。在治

9、療第6、12和24周時觀察兩組的臨床癥狀（發(fā)熱、皮疹、關(guān)節(jié)炎癥狀），檢測其炎癥指標(biāo)，并與兩組治療前相比較。兩組的 JADAS27，ESR和CRP水平在所有觀察點較治療前均有顯著改善（P＜0.05）。在治療第6、12和24周，托珠單抗組的JADAS-27評分顯著低于糖皮質(zhì)激素組（P＜0.05）。在治療第6、12周，托珠單抗組的ESR水平顯著低于糖皮質(zhì)激素組（P＜0.05）。在治療第12、24周，托珠單抗組的CRP水平顯著低于糖皮質(zhì)激素組（