轉化生長因子βⅢ型受體在心房顫動心房纖維化中的作用研究.pdf

1、心房顫動（房顫）是臨床實際中最常見的心律失常，也是導致死亡率增加的常見原因，房顫與遠期卒中、心力衰竭等死亡危險直接相關。心房重構是房顫發(fā)生基礎，房顫自身又可以促重構而加重房顫的發(fā)生、發(fā)展。持續(xù)性房顫的發(fā)生是以心房的組織重構和電重構為基礎的慢性進展過程。心房結構重構最顯著的特征是心房纖維化，在慢性心房顫動的維持中發(fā)揮了重要的作用，延緩心房的結構重構能有效地預防房顫的復發(fā)，在房顫治療中有積極作用。TGF-β信號通路是一多功能的通路，是啟動和

2、終止組織修復的關鍵細胞因子，也是調(diào)節(jié)組織纖維化的基礎，與心房顫動的相互關系密切。TGFBR3（轉化生長因子βⅢ型受體，transforming growth factorbeta typeⅢ receptor，也被稱為betaglycan）作為TGF-β受體的一部分，與心肌纖維化密切相關，但其在房顫發(fā)病作用機制仍有待確定。本研究將通過房顫患者研究TGFBR3與心房纖維化的關系，并通過對大鼠心房成纖維細胞的干預實驗研究TGFBR3對TGF

3、β信號通路的調(diào)控作用探討TGFBR3在心房顫動心房纖維化中的作用。
　　方法:
　　(1)104例開胸手術患者，分為房顫組（43例）和竇律組（61例）。術中收取少量右心耳組織，HE染色觀察形態(tài)學變化，電鏡觀察超微結構變化，masson染色觀察心房膠原纖維沉積變化，實時熒光定量PCR及WesternBlot檢測兩組患者右心耳TGFBR3、Smad2、纖維連接蛋白(Fibronectin)mRNA和蛋白的表達水平。
　　(

4、2)實時熒光定量PCR及Western Blot檢測不同濃度和不同時間TGFβ刺激下原代SD大鼠的乳鼠心房成纖維細胞。
　　(3)利用siRNA干擾技術，沉默和過表達SD乳鼠心房成纖維細胞TGFBR3表達，探討TGFBR3調(diào)控的TGF-β信號通路在房顫心房纖維化中的作用，為房顫發(fā)病機制的研究提供新的思路。
　　研究結果顯示:
　　1.
　　(1)竇律組患者右心耳TGFBR3 mRNA表達水平(0.9672±0.5

5、436)明顯高于房顫心律組(0.4718±0.3399)，t=4.455，P＜0.05;竇律組右心耳(1.2020±1.05783) TGFBR3蛋白表達水平明顯高于房顫組患者(0.7471±0.3990)，t=2.331，P＜0.05。
　　(2)竇律組患者右心耳Smad2 mRNA表達水平(0.4615±0.2281)明顯低于房顫組(4.3095±0.1311)，t=-1.483，P＜0.05;竇律組右心耳Smad2蛋白表達水

6、平(0.8636±0.4795)明顯低于房顫組患者(1.2758±0.8141)，t=46.128，P＜0.05。
　　(3)竇律組右心耳Fibronectin mRNA表達水平(1.5884±0.9480)明顯低于房顫組患者(2.2621±1.6670)，t=-2.093，P＜0.05;竇律組Fibronectin蛋白表達水平(1.5998±1.0376)明顯低于房顫組(2.5122±1.9485)，t=-2.268，P＜0.0

7、5。，t=-2.268，P＜0.05。
　　2.體外細胞學實驗結果:
　　(1)慢病毒轉染大鼠乳鼠心房成纖維細胞沉默和過表達TGFBR3基因，表明TGFBR3有抗纖維化的作用;
　　(2)TGF-β干預大鼠原代心房成纖維細胞結果: TGF-β促進大鼠心房成纖維細胞分泌Fibronectin，并呈現(xiàn)濃度依賴性和時間依賴性，降低TGFBR3的表達。
　　以上結果顯示，TGFBR3下調(diào)在心房纖維化發(fā)生的過程中起著重要作