褪黑素對成骨細(xì)胞在純鈦四種處理表面生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的：（1）通過對比觀察四種純鈦處理表面MC3T3-E1成骨細(xì)胞附著和伸展?fàn)顩r來探討表面形貌、粗糙度、潤濕性對細(xì)胞附著和伸展的影響。（2）觀察褪黑素對純鈦不同處理表面成骨細(xì)胞的增殖、遷移和鈣化作用是否不同。
　　方法：（1）實驗分四組：機械打磨組（G組）、酸蝕組（G-S組，簡稱S組）、微弧氧化組（G-S-MAO組，簡稱MAO組）、堿處理組（G-S-MAO-OH組，簡稱OH組）。掃描電鏡（SEM）觀察表面形貌，粗糙度測量儀測定表面粗

2、糙度，接觸角測量儀測定表面浸潤角，CCK-8檢測30min、60min、120min的細(xì)胞附著量，激光共聚焦觀察3h、6h、12h成骨細(xì)胞骨架形態(tài)變化。(2)應(yīng)用CCK-8檢測MT不同濃度對成骨細(xì)胞增殖的影響，選定MT濃度后，實驗在以上四組的基礎(chǔ)上每組加入MT,即分為G、S、MAO、OH、G+MT、S+MT、MAO+MT、OH+MT八組。應(yīng)用CCK-8檢測每組24h、48h、72h的細(xì)胞增殖量；激光共聚焦觀察每組細(xì)胞的遷移；茜素紅染色檢

3、測每組鈣化情況。
　　結(jié)果：（1） Ra粗糙度：MAO（0.526±0,017um）﹥OH（0.460±0.019um）﹥S（0.102±0.010um）﹥G（0.056±0.005um）；（2）浸潤角測定：G（66.333°±2.073°）﹥S（61.518°±0.791°）﹥MAO（21.707°±1.555°）﹥OH（5.363°±0.669°)；（3）早期附著量：30min時S﹥G﹥MAO﹥OH，60min和120min時

4、MAO﹥S﹥OH﹥G；（4）成骨細(xì)胞骨架形態(tài)變化：3hG組細(xì)胞沿表面橫紋規(guī)律性排列且微絲沿橫紋向分布，S組部分呈圓形尚未鋪展開，MAO組細(xì)胞向四周伸出短的偽足，OH組；6hG組細(xì)胞沿橫紋進(jìn)一步伸長，S組呈現(xiàn)不規(guī)則梭形或四邊形，MAO組向四周伸出絲狀偽足， OH組細(xì)胞向四周伸出多個偽足；12hG組細(xì)胞沿橫紋呈窄長條型，S組部分形態(tài)未發(fā)生改變，部分向四周伸出絲狀偽足；MAO組細(xì)胞向四周伸出部分板狀偽足，而 OH組已完全向四周伸出板狀偽足；(

5、5)不同濃度MT成骨細(xì)胞增殖量：50umol/L﹥100 umol/L﹥10 umol/L﹥0 umol/L；（6）每組成骨細(xì)胞增殖量：除72h時，OH組加MT前后比較無統(tǒng)計學(xué)差異，其它時間點剩余組在加 MT前后比較均具有統(tǒng)計學(xué)差異。（7）成骨細(xì)胞遷移度：四組不同表面加入MT后成骨細(xì)胞的遷移度增加。（8）每組成骨細(xì)胞鈣化比較：四組表面加入MT后鈣化度提高，納米粗糙表面鈣化度提高較明顯。
　　結(jié)論：（1）G、S納米粗糙表面更利于最初