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1、目的:通過體外培養(yǎng)乳鼠成骨細(xì)胞建立細(xì)胞系,檢測(cè)鼠成骨細(xì)胞在經(jīng)四種不同方法處理后鈦片表面的附著、增殖及活性;對(duì)比研究鈦片常規(guī)單一處理與復(fù)合處理的區(qū)別,探討酸蝕加堿熱鈦植入材料表面處理的可行性。
方法:采用新生 SD(24小時(shí)內(nèi))大鼠顱蓋骨培養(yǎng)成骨細(xì)胞;倒置相差顯微鏡和蘇木精伊紅染色(HE),觀察鼠成骨細(xì)胞形態(tài);并對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行堿性磷酸酶染色(ALP)和茜素紅礦化結(jié)節(jié)細(xì)胞化學(xué)染色鑒定。取體外培養(yǎng)的第四代鼠成骨細(xì)胞用于各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。實(shí)
2、驗(yàn)分為四組:光滑組、堿熱組、酸蝕組及酸蝕加堿熱組,每組鈦片各30例。用掃描電鏡觀測(cè)實(shí)驗(yàn)前各處理組鈦片表面形態(tài)及實(shí)驗(yàn)中鼠成骨細(xì)胞在鈦片表面的生長(zhǎng)情況。用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)1天、2天、3天、6天、7天各處理組鈦片表面的細(xì)胞數(shù),以監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線;用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT法)測(cè)定在不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞的增殖情況,以堿性磷酸酶試劑檢測(cè)盒檢測(cè)細(xì)胞的活性。
結(jié)果:鼠成骨細(xì)胞在四種不同處理組鈦片表面均能較好的附著,且生長(zhǎng)情況良好,其
3、生長(zhǎng)曲線與體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線基本一致;在細(xì)胞增殖測(cè)試中,培養(yǎng)早期(1、2天)測(cè)得的各組細(xì)胞密度沒有明顯差別(P>0.05);培養(yǎng)3天后,酸蝕加堿熱處理組的細(xì)胞密度明顯高于光滑組和堿熱組(P<0.01),略高于酸蝕組(P<0.05)。在ALP活性檢測(cè)中,在3天和6天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)上,四組之間ALP活性都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),各處理組ALP活性大小依次為:酸蝕加堿熱組〉酸蝕組〉堿熱組〉光滑組。
結(jié)論:體外培養(yǎng)的鼠成骨細(xì)
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