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文檔簡介
1、目的:觀察唑來膦酸(zoledronicacid,ZOL)對(duì)原代成骨成纖維細(xì)胞增殖、分化以及礦化的影響。
方法:體外培養(yǎng)發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位(Developmental Dysplasia of the Hip,DDH)及成骨不全(Osteogenesis imperfecta,OI)髂骨來源的成骨細(xì)胞、成纖維細(xì)胞,采用MTT法測定10-3M-10-13M濃度梯度下唑來膦酸對(duì)四種原代細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞檢測10-8M,10
2、-9M,10-10M唑來膦酸藥物濃度對(duì)細(xì)胞周期的影響;ELISA檢測10-8M,10-10M藥物濃度對(duì)堿性磷酸酶(ALP)活性的影響;茜素紅染色檢測10-6M,10-8M,10-10M,10-12M藥物濃度對(duì)成骨細(xì)胞礦化功能的影響;10-10M唑來膦酸培養(yǎng)21天后用RT-PCR技術(shù)檢測成骨細(xì)胞ALP,OPG,OCN,COL1A2的基因表達(dá)。
結(jié)果:唑來膦酸藥物濃度范圍為10-7M-10-10M對(duì)四種細(xì)胞增殖的抑制作用不明顯
3、;小于等于10-11M對(duì)細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用趨勢,最高達(dá)到20%左右(P<0.05);10-8M-10-10M范圍藥物濃度對(duì)細(xì)胞周期的G1/G0期有阻滯作用,阻滯率在0-38%左右;四種原代細(xì)胞ALP水平在10-8M及10-10M實(shí)驗(yàn)藥物濃度作用6天后與對(duì)照相比沒有變化;10-10M藥物濃度對(duì)原代成骨細(xì)胞的礦化沒有促進(jìn)作用;與正常對(duì)照相比10-10M藥物濃度作用21天后,成骨細(xì)胞ALP,OPG,OCN,COL1A2的mRNA表達(dá)量是下調(diào)的
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