外源性NGF對體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞增殖、分化和礦化的影響.pdf

1、目的：臨床實(shí)踐中常常會發(fā)現(xiàn)，截癱和顱腦損傷患者伴隨有四肢骨折時(shí)，往往在骨折斷端可見到大量不成熟的骨痂生長，甚至肌肉內(nèi)可以出現(xiàn)異位骨化。同時(shí)，一些神經(jīng)疾病患者的骨折成骨量也較一般人多，因此可以認(rèn)為神經(jīng)系統(tǒng)參與了骨折的愈合過程。作為神經(jīng)系統(tǒng)中重要的營養(yǎng)因子NGF對骨組織中最重要的細(xì)胞成骨細(xì)胞的影響現(xiàn)在還不是十分清楚。因此本實(shí)驗(yàn)研究外源性神經(jīng)生長因子(NGF)對體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞增殖、分化和礦化的影響。 方法：取出生24h Wista

2、r大鼠顱蓋骨，剃凈后剪成碎塊，采用改良組織塊混合酶消化法培養(yǎng)成骨細(xì)胞，將不同濃度的NGF(1pg/ml，10pg/ml，100pg/ml，500pg/ml，1000pg/ml)加入成骨細(xì)胞的培養(yǎng)基繼續(xù)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，7天后用MTT法測定細(xì)胞的增殖情況，堿性磷酸酶試劑盒檢測成骨細(xì)胞堿性磷酸酶的活性，免疫組織化學(xué)染色法檢測Ⅰ型膠原的量，3周后茜素紅鈣染法檢測礦化結(jié)節(jié)形成。 結(jié)果：對成骨細(xì)胞增殖的影響：低濃度的NGF(<100 pg/m

3、l)OD值明顯較對照組高(P<0.05)，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異；對成骨細(xì)胞分化的影響：500pg/ml，100pg/ml，10pg/ml這三個濃度組的ALP活性(OD值)較對照組高(P<0.05)，分泌Ⅰ型膠原的量(OD值)也較其他各組高(P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；對成骨細(xì)胞礦化的影響，各組無顯著性差異。 結(jié)論：外源性NGF對體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞具有增殖作用、可以促進(jìn)成骨細(xì)胞的分化，增強(qiáng)ALP的活性，促進(jìn)Ⅰ型膠原的分泌，但