唑來膦酸對(duì)成骨細(xì)胞增殖及IGF-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察唑來膦酸對(duì)體外大鼠成骨細(xì)胞增殖及IGF-1表達(dá)的影響，進(jìn)而分析其對(duì)成骨質(zhì)量的影響，為臨床用藥提供一定的理論依據(jù)。
　　 方法：1培養(yǎng)大鼠成骨細(xì)胞，并觀察其形態(tài)和功能。2 實(shí)驗(yàn)分組：實(shí)驗(yàn)組：含有不同濃度唑來膦酸（10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L）的培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞。對(duì)照組：使用普通培養(yǎng)基（唑來膦酸含量0mol/L）培養(yǎng)的細(xì)胞。3 以大鼠成骨細(xì)胞為體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停捎盟募谆嫉?/p>

2、鹽（MTT）比色法檢測不同濃度唑來膦酸作用于原代培養(yǎng)的乳鼠成骨細(xì)胞7天后的增殖情況，測定OD值。使用ALP 試劑盒檢測堿性膦酸酶的活性。4不同濃度唑來膦酸（10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L、0mol/L）干預(yù)原代培養(yǎng)的乳鼠成骨細(xì)胞7天后，通過ELISA 方法檢測IGF-1表達(dá)水平。5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：實(shí)驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)示，采用spss13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，各組總體上有

3、無差別采用單因素方差分析，組間比較采用LSD法分析，p<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：1我們培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞多呈長梭形，堿性膦酸酶染色呈陽性，培養(yǎng)液中加入β-甘油膦酸鈉和維生素C 培養(yǎng)15天后茜素紅染色陽性。2不同濃度的唑來膦酸（10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L、0mol/L）作用于原代成骨細(xì)胞7天后，唑來膦酸濃度≥10-5mol/L時(shí)抑制成骨細(xì)胞增殖，與對(duì)照組比較，OD值

4、顯著減少（P<0.01）。唑來膦酸濃度為10-6-10-7mol/L時(shí)，與對(duì)照組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異均無顯著性。（P>0.05），不影響細(xì)胞增殖。3 唑來膦酸對(duì)成骨細(xì)胞生成ALP的抑制作用在≥10-6mol/L時(shí)出現(xiàn)，比對(duì)成骨細(xì)胞增殖的抑制作用更明顯。4通過ELISA 定量檢測原代培養(yǎng)的成骨細(xì)胞IGF-1的表達(dá)。結(jié)果顯示，唑來膦酸濃度在10-6-10-7mol/L時(shí)，不影響IGF-1的表達(dá)，即較低濃度的實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較統(tǒng)計(jì)學(xué)差異無顯著性（