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文檔簡介
1、目的: 觀察雌激素對不同階段成骨細胞中caveolin-1(小凹蛋白-1)表達的影響,并研究caveolin-1在雌激素調節(jié)成骨細胞分化成熟過程中的作用。 方法: 將雌激素分別作用于增殖期(第2天)、分化期(第6天)、礦化期(第12天)的成骨細胞(MC3T3-E1)48小時,采用westernb lotting方法觀察caveolin-1蛋白表達變化。對于分化期MC3T3-E1細胞,采用caveolin-1
2、真核表達質粒Pcl-neo-cav-1上調caveolin-1表達后,觀察其對雌激素調節(jié)成骨細胞代謝作用的影響,觀察指標分別為細胞裂解液ALP活性(PNPP法)、培養(yǎng)上清骨鈣素濃度(ELISA)以及成骨細胞特異性分化因子cbfa-1mRNA表達水平(RT-PCR)。最后,通過檢測細胞培養(yǎng)基一氧化氮水平,探索caveolin-1作用機制。 結果: 1.雌激素可劑量依賴下調分化期MC3T3-E1細胞caveolin-1蛋
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