rhPTH(1-34)對成骨細胞增殖、CollagenI及OsterixmRNA表達的影響.pdf

1、目的：
　　 觀察間歇給予重組人甲狀旁腺激素（1-34）[rhPTH(1-34)]對體外成骨細胞增殖、I 型膠原蛋白（Collagen I）及Osterix mRNA表達的影響，初步探討rhPTH（1-34）對體外成骨細胞的作用機制，為臨床用藥提供一定的理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 1、體外培養(yǎng)成骨細胞，并觀察其形態(tài)和功能。
　　 2、以新生大鼠成骨細胞為體外實驗?zāi)Ｐ?，將成骨細胞分為空白對照組和10-1

2、1、10-10、10-9、10-8、10-7M rhPTH（1-34） 5個不同劑量的給藥組，以24小時為一個培養(yǎng)周期，僅在前12小時加rhPTH（1-34），48小時后，采用MTT 法檢測細胞的增殖，用半定量RT-PCR法測定成骨細胞Collagen I、Osterix mRNA的表達。
　　 3、統(tǒng)計學(xué)方法實驗所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析，各組總體上有無差別采用單因素方差分析，

3、組間兩兩比較采用LSD 法分析，P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1、體外培養(yǎng)的新生大鼠成骨細胞多為梭形，三角形或不規(guī)則的多邊形，胞核呈圓形或橢圓形，居中或偏于一側(cè)，周圍細胞以突起相連。堿性磷酸酶染色呈陽性反應(yīng)，胞漿呈灰黑色顆粒；茜素紅染色呈深紅色結(jié)節(jié)。
　　 2、不同濃度的rhPTH（1-34）作用于成骨細胞后，各組OD值均增高，在10-11-10-9M呈劑量依賴關(guān)系，以10-9M 增殖最高。對

4、照組與實驗組，實驗組組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　 3、不同濃度的rhPTH（1-34）作用于成骨細胞后，Collagen I及Osterix mRNA表達增加，光密度比值增加，在10-11-10-9M呈劑量依賴關(guān)系，以10-9M表達最高。對照組與實驗組，實驗組組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1、重組人甲狀旁腺激素（1-34）可以促進成骨細胞增殖。