氟對(duì)成骨細(xì)胞凋亡的影響及其分子機(jī)制研究.pdf

1、本研究主要內(nèi)容是以人成骨樣細(xì)胞株OS-732為研究對(duì)象，探討高劑量氟對(duì)人成骨細(xì)胞凋亡的影響，并進(jìn)一步研究了氟誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制?！　》c可以誘導(dǎo)多種細(xì)胞發(fā)生凋亡，本研究將探索氟化鈉對(duì)人成骨樣細(xì)胞株OS-732細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究氟誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡的機(jī)制.通過MTT法檢測證明氟可以顯著的抑制成骨細(xì)胞的增殖能力.利用Hoechst33342染色、瓊脂糖凝膠電泳、流式細(xì)胞儀等方法檢測氟對(duì)成骨細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用，

2、結(jié)果顯示氟可以誘導(dǎo)成骨細(xì)胞細(xì)胞核發(fā)生變化、產(chǎn)生凋亡小體、DNA片斷化、顯著提高細(xì)胞凋亡率、降低線粒體膜電位.為了探索氟誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡的發(fā)生機(jī)制，本研究利用半定量RT-PCR檢測氟對(duì)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和BaxmRNA水平的影響，并通過westernblot檢測氟對(duì)抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax和Bak蛋白表達(dá)的影響，結(jié)果證明氟可以顯著提高促凋亡蛋白BaxmRNA水平而抑制抗凋亡蛋白Bcl-2mRNA水平.Westernblo

3、t分析結(jié)果顯示氟可以顯著的提高促凋亡蛋白Bax和Bak的表達(dá)，抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)。通過顯色法檢測可以得到氟可以顯著提高酪氨酸蛋白激酶Caspase-3的活性。　　因此，本研究成功建立了氟誘導(dǎo)人成骨樣細(xì)胞株凋亡模型，并首次對(duì)氟誘導(dǎo)成骨細(xì)胞株凋亡的機(jī)制進(jìn)行了初步研究，根據(jù)現(xiàn)有理論，綜合本研究，本文認(rèn)為，NaF可能至少部分地通過如下的信號(hào)傳導(dǎo)途徑誘導(dǎo)人成骨樣細(xì)胞株發(fā)生凋亡：通過抑制凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達(dá)和增強(qiáng)促凋亡蛋白Ba