靜磁場對鼠成骨細胞內(nèi)鈣離子濃度的影響.pdf

1、目的：觀察體外培養(yǎng)的大鼠顱骨成骨細胞，在不同強度靜磁場作用下，不同時間點細胞的增殖情況，并進一步研究在適宜強度靜磁場作用下，細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化，以期進一步探討靜磁場在促成骨細胞增殖中可能的作用機制。 方法: 1、細胞培養(yǎng) 原代培養(yǎng)大鼠顱骨成骨細胞，并進行細胞的形態(tài)觀察，用堿性磷酸酶染色和鈣結(jié)節(jié)染色法作細胞鑒定。 2、MTT法檢測成骨細胞增殖率 檢測成骨細胞在0Gs、260Gs、440Gs、90

2、0Gs的磁場強度作用下，24h、48h、72h的增殖率，每組取測得結(jié)果的平均值作為最終結(jié)果。 3、熒光測鈣 選用440Gs強度的靜磁場，利用數(shù)字化熒光顯微鏡系統(tǒng)和熒光雙波長分光光度計觀察和測定鈣離子在細胞內(nèi)的分布及濃度變化，其中鈣離子濃度值參照特定公式進行計算后各組取平均值。 4、統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS for Windows 11.0統(tǒng)計分析軟件對結(jié)果進行分析。單因素方差分析(ANOVA)用于比較成骨

3、細胞增殖率，Dunnett-t檢驗用于比較成骨細胞內(nèi)鈣離子濃度值。顯著性水平定為：P<00.5時有顯著性差異，P<0.01時有高度顯著性差異。 結(jié)果: 1、細胞培養(yǎng) 原代培養(yǎng)的成骨細胞，貼壁生長，形態(tài)呈梭形、三角形或多角形，堿性磷酸酶染色和鈣結(jié)節(jié)染色呈陽性著色。 2、MTT方法檢測 只有磁場強度為440Gs時，成骨細胞在48h內(nèi)，出現(xiàn)明顯增殖(P<0.01)。靜磁場作用72h時檢測，440Gs組和

4、900Gs組經(jīng)統(tǒng)計分析與OGs之間存在高度顯著性差異(P<0.01)。 3、熒光測鈣 數(shù)字化熒光顯微鏡系統(tǒng)觀察，靜磁場作用前后胞內(nèi)鈣離子熒光強度基本沒有變化，成骨細胞中部層面內(nèi)，熒光信號較強，細胞核內(nèi)熒光信號最強，且在同一層面內(nèi)鈣熒光信號強度不均勻。成骨細胞在靜磁場作用5min、10min時，鈣離子濃度與對照組比較無顯著性差異，作用15min時，經(jīng)統(tǒng)計分析與對照組之間存在高度顯著性差異(P<0.01)。 結(jié)論: