靜磁場(chǎng)對(duì)鈷、鉻離子作用下成骨細(xì)胞活力及其分泌RANKL、OPG的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過觀察靜磁場(chǎng)作用下金屬Co2+、Cr3+離子對(duì)小鼠成骨細(xì)胞(MC3T3E1)細(xì)胞活力及其對(duì)成骨細(xì)胞分泌RANKL、OPG的影響,探討靜磁場(chǎng)作用下金屬離子對(duì)成骨細(xì)胞的影響,尋找防治假體周圍骨溶解的新方法。
　　 方法:體外培養(yǎng)小鼠成骨細(xì)胞,細(xì)胞密度為1×105個(gè)/ml。在不同靜磁場(chǎng)強(qiáng)度(1mT、10mT、100mT)作用下將金屬Co2+、Cr3+離子與成骨細(xì)胞體外共培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分為4組,實(shí)驗(yàn)組:Co2+、Cr3+離子(A組)

2、,實(shí)驗(yàn)組(B、C、D組):Co2+、Cr3++離子+不同磁場(chǎng)強(qiáng)度(1mT、10mT、100mT)。采用MTT法、ELISA和RT-PCR法分別在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)細(xì)胞活力及RANKL、OPG蛋白水平和基因水平進(jìn)行檢測(cè)。
　　 結(jié)果:MTT顯示與對(duì)照組相比,在靜磁場(chǎng)作用下鈷鉻離子對(duì)成骨細(xì)胞毒性呈降低趨勢(shì)。ELISA檢測(cè)顯示:與對(duì)照組相比,不同磁場(chǎng)強(qiáng)度作用下Co2+、Cr3+與成骨細(xì)胞相互作用24h后,B、C、D各組RANKL分泌量分別下

3、降9.5％、22.5％、22.6％(P<0.05)；48h后,RANKL的分泌量各下降7.6％、11.2％、19.6％(P<0.05)。與對(duì)照組相比,在不同磁場(chǎng)強(qiáng)度作用下Co2+、Cr3+與成骨細(xì)胞相互作用24h后,B、C、D各組OPG的分泌量增長(zhǎng)7.2％、8.7％、22.4％(P<0.05)；48h后,B組OPG的分泌量增長(zhǎng)0.74％,C、D組OPG分泌量各增長(zhǎng)11.9％、23.9％(P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。RT-PCR檢測(cè)

4、示共培養(yǎng)24、48h后,各組中均有RANKL、OPG基因的表達(dá)。與對(duì)照組相比,不同磁場(chǎng)強(qiáng)度作用下Co2+、Cr3+與成骨細(xì)胞相互作用24h后,各組RANKL基因表達(dá)量分別下降5.9％、16.9％、21.1％(P<0.05)；48h后,RANKL基因表達(dá)量各下降9.3％、21.9％、26.1％(P<0.05)。24h后,各組OPG基因表達(dá)量分別上升2.7％、4.9％、3.1％(P<0.05)；48h后,OPG基因表達(dá)量各上升0.83％、3

5、.9％、5.7％(P<0.05)；在不同時(shí)間點(diǎn)各實(shí)驗(yàn)組RANKL基因表達(dá)量與對(duì)照組相比顯著下降,其中C、D組下降幅度較為明顯,而OPG基因表達(dá)量上升幅度較小。B、C、D組RANKL/OPG的比值不論是蛋白水平還是基因水平均較A組明顯降低；其中C、D組RANKL/OPG的比值下降幅度大于B組。
　　 結(jié)論:靜磁場(chǎng)能拮抗Co2+、Cr3+金屬離子對(duì)成骨細(xì)胞的毒性作用,同時(shí)能一定程度增加成骨細(xì)胞OPG的釋放及減少成骨細(xì)胞RANKL的分