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文檔簡介
1、目的:初步探討聚磷酸鈣纖維/磷酸鈣骨水泥復合材料對體外人成骨細胞OPG/RANKL系統(tǒng)的影響,為其臨床應用提供理論依據。
方法:1.將CPPF及CPC按質量比1∶9均勻混合,按固液比3∶1加入固化液,使之呈均勻稠厚糊狀,將其倒入自制的直徑3.0cm,厚度3mm的圓柱形模具中,凝固后消毒備用。
2.培養(yǎng)人成骨細胞樣細胞系MG63,調整細胞濃度為1x105,并接種至含自制CPPF/CPC復合材料模塊的細胞培養(yǎng)板(骨水泥組
2、)中和普通六孔培養(yǎng)板(正常組)中,采用計數(shù)法測定細胞培養(yǎng)0h、6h、12h、24h、36h、48h的細胞數(shù)量。
3.應用RT-PCR檢測細胞培養(yǎng)36h時兩組OPG和RANKL的mRNA表達量。
4.應用Western blot檢測細胞培養(yǎng)36h時兩組OPG和RANKL的蛋白表達量及其比值。
結果:1.骨水泥組于6h、12h、24h細胞數(shù)量明顯低于正常組,具有統(tǒng)計學差異(P<0.05),而于36h、48h的細
3、胞數(shù)量與正常組比較,無統(tǒng)計學差異(p>0.05)。
2.骨水泥組細胞培養(yǎng)36h時OPG與RANKL在mRNA水平的表達量均較正常組明顯增高,有統(tǒng)計學差異(p<0.05)。
3.骨水泥組細胞培養(yǎng)36h時OPG與RANKL在蛋白水平的表達量均較正常組明顯增高,有統(tǒng)計學差異(p<0.05),然而OPG/RANKL比值較正常組明顯降低,且具有統(tǒng)計學差異(p<0.05)。
結論:1.按1:9混合的CPPF/CPC復合
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