水溶性CuInS2-ZnS-AFP量子點熒光探針對肝癌細胞的標記及毒性研究.pdf

1、目的:通過檢測水溶性 CuInS2-ZnS-AFP熒光探針對肝癌細胞株（Hep-G2）的毒性，及其生物相容性，綜合評估其用于肝癌研究的可能性。
　　方法:免疫組化方法證實肝癌細胞株 Hep-G2可表達 AFP抗原后，選取 AFP作為靶向抗原。制備水溶性量子點 CuInS2-ZnS，檢測其光學性能、符合生物學熒光要求后，偶聯(lián)抗 AFP抗體，成為可與 AFP抗原相結合的、具有靶向性的量子點熒光探針CuInS2-ZnS-AFP。用MTT

2、法和流式細胞術檢測該探針對肝癌細胞株Hep-G2的增殖抑制及促凋亡作用，驗證該探針的生物毒性。將 CuInS2-ZnS量子點與Hep-G2共培養(yǎng)的方法觀察細胞形態(tài)，并用量子點探針 CuInS2-ZnS-AFP對 Hep-G2細胞株進行標記顯色，驗證其生物相容性。
　　結果:實驗通過免疫組化法證實了Hep-G2細胞漿大量表達AFP抗原。量子點光學性能測試表明 CuInS2-ZnS量子點的有合適的 Stokes’頻移，適合用于細胞標記

3、。MTT實驗表明 CuInS2-ZnS-AFP熒光探針對 Hep-G2細胞的毒性很小，標記濃度（0.24mg/ml）下24h細胞存活率大于90％，此條件下的CdTe-ZnS-AFP量子點探針的細胞存活率約70%。CuInS2-ZnS-AFP組低濃度（＜20%）下抑制率與時間無統(tǒng)計學關系（P＞0.05），中高濃度下抑制率與孵育時間和探針濃度呈正相關， CdTe-ZnS-AFP組抑制率與孵育時間和探針濃度呈時間-效應（P＜0.05）和劑量-

4、效應（P＜0.05）。流式細胞術檢測標記濃度的探針與 Hep-G2細胞共培養(yǎng)2h、6h、24h、48h和72h后的細胞凋亡率，數(shù)據(jù)與 MTT結果基本一致。CuInS2-ZnS量子點與 Hep-G2共培養(yǎng)后細胞無明顯形態(tài)學改變，細胞標記實驗發(fā)現(xiàn)紫外光激發(fā)下 CuInS2-ZnS-AFP熒光探針在 Hep-G2細胞漿內(nèi)發(fā)射出很強的黃色熒光，即與CuInS2-ZnS量子點連接后所得探針保留了量子點獨特的光學性能。
　　結論:（1）本實驗