黨參均一多糖及其硫酸酯制備和抗腫瘤活性初步研究.pdf

1、目的：對(duì)水提醇沉得到的粗多糖(COP)進(jìn)行分離純化,并解析純化的均一多糖結(jié)構(gòu)，接著對(duì)均一多糖進(jìn)行硫酸化，還要對(duì)硫酸酯化多糖結(jié)構(gòu)分析。同時(shí)初步研究均一多糖及其硫酸酯對(duì)腫瘤細(xì)胞的影響。
　　方法：采用Sevage法除去蛋白成份，接著通過(guò)Sephacryl S-200 HR凝膠色譜柱和 Sephadex G-75凝膠色譜柱及 Sephadex G-25凝膠色譜柱分離得到均一多糖COP-1、COP-2和COP-3。高效凝膠滲透色譜法(HP

2、GPC)測(cè)定其純度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量曲線計(jì)算平均分子量。同時(shí)通過(guò)熔點(diǎn)儀測(cè)量熔點(diǎn)可以判定多糖純度。高效液相色譜法(HPLC)確定COP-1、COP-2單糖組成和氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)確定 COP-3單糖的組份。紅外光譜及核磁推測(cè)結(jié)構(gòu)。采用氨基磺酸法對(duì)三均一組分(COP-1、COP-2、COP-3)硫酸酯化，通過(guò)氯化鋇-比濁法確定多糖硫酸酯的取代度。CCK8法測(cè)定COP-1、COP-2及其硫酸酯對(duì)HT29人體結(jié)腸癌細(xì)胞的毒性。結(jié)果：C

3、OP-1、COP-2和COP-3平均分子量分別約為2.1×103 Da，9.9×103 Da，2.34×104 Da，COP-1、COP-2均由β-D-(2→1)呋喃果糖組成, COP-3主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖組成，并且它們的摩爾比為：4.3:1:3.7。COP-1熔點(diǎn)范圍為：250.2~252.8℃， COP-2熔點(diǎn)范圍為：264.7~266.9℃，COP-3熔點(diǎn)范圍為：313.6~315.8℃。經(jīng)氯化鋇-明膠比濁法分析SCOP

4、-1、SCOP-2和SCOP-3取代度，結(jié)果DSSCOP-1=0.28，DSSCOP-2=0.25，DSSCOP-3=1.63。COP-2在給藥濃度為50μg/mL，與空白組比較統(tǒng)計(jì)學(xué)有差異(P＜0.01)，在其他濃度給藥時(shí)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SCOP-2、COP-1和 SCOP-1在不同給藥濃度與空白組比較也沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：純化得到的均一多糖 COP-1和 COP-2是一種中性糖，都是由果糖以β-D-(2