紅豆杉多糖純化、結(jié)構(gòu)分析和抗腫瘤活性研究.pdf

1、紅豆杉是一種非常稀有且具有悠久歷史的植物，自從在紅豆杉樹皮和枝葉中提取得到紫杉醇后，人們對(duì)它的關(guān)注日益受到加強(qiáng)。但是按照目前的提取工藝，紫杉枝葉在被提取紫杉醇后，往往被丟棄，既浪費(fèi)了資源，又污染了環(huán)境。實(shí)際上紫杉中除含有重要的天然抗腫瘤藥物—紫杉醇外，還其它一系列生物活性物質(zhì)—如萜類、黃酮類及生物堿等，最近我們從紅豆杉葉中發(fā)現(xiàn)并分離純化得到一種大分子生物活性物質(zhì)—紅豆杉多糖，目前尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。 本工作主要是從對(duì)前期所提取得到的

2、粗多糖進(jìn)行進(jìn)一步的純化、結(jié)構(gòu)分析和抗腫瘤藥理活性研究。在對(duì)紅豆杉粗步提取后，對(duì)其進(jìn)行脫色處理，主要使用雙氧水、大孔吸附樹脂和離子交換樹脂等三種方法。通過研究發(fā)現(xiàn)雙氧水的最佳脫色條件是在使用15％的雙氧水濃度，pH 9.0，溫度為40℃和反應(yīng)40min，在這個(gè)條件下脫色率和糖保留率分別為60.4％和84.7％。在靜態(tài)樹脂篩選中Purolite的陰離子交換樹脂A500P、Amberlite的中性大孔吸附樹脂和非極性大孔吸附樹脂NKA、X5都

3、具有較好的脫色效果，最佳脫色條件是pH5.9、溫度35℃和150min。在動(dòng)態(tài)脫色時(shí)A500P、XAD7HP和NKA以5BV/h具有較好的脫色效果，X5以1BV/h具有較好的脫色效果，脫色糖溶液體積均為4BV.將脫完色的多糖溶液通過使用DEAE-Sepharose FF和乙醇分級(jí)，最后通過Sephadex G-25脫鹽，得到4種組分的多糖(分別命名為PCH1,PCH2,PCH3和PCH0.5)。之后多糖進(jìn)行包括化學(xué)和光譜儀器分析方法在內(nèi)

4、的結(jié)構(gòu)分析，發(fā)現(xiàn)此多糖PCH2、PCH3和PCH0.5的分子量(MW)分別為5.8×103D、5.43×104D和1.78×105D，由2,4-二氧甲基-D-甘露糖，2-脫氧-D-葡萄糖，D-木糖(α型)，D-木糖(β型)，D-阿拉伯糖，D-甘露糖，D-半乳糖組成含量比為2∶6∶28∶9∶3∶3∶49，同時(shí)具有吡喃糖α-和β-端基差向異構(gòu)的C-H變角振動(dòng)，具有較多的支鏈組成。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)明確了此多糖在腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用、對(duì)整體動(dòng)物的耐受力