醉魚草莖葉抗H5N1病毒活性成分研究.pdf

1、自我國香港1997年發(fā)現(xiàn)首例人感染禽流感病毒（ H5N1）病例至今（2016.01.20），全球16個(gè)國家和地區(qū)共計(jì)確診（H5N1）846例，其中死亡449例，死亡率為53.07％，其中我國報(bào)告確診53例，死亡31例，死亡率高達(dá)58.49%。我國是一個(gè)人口大國，高致病性禽流感（H5N1）嚴(yán)重威脅人民健康和國民經(jīng)濟(jì)，且若出現(xiàn)人傳人變異，后果將不可設(shè)想。
　　本課題組前期通過查閱中醫(yī)藥學(xué)典籍和文獻(xiàn)調(diào)研，以 A/Tiger/Harbin

2、/01/2002病毒感染的犬腎細(xì)胞株MDCK細(xì)胞為模型，采用細(xì)胞病變（CPE）法，對(duì)中草藥抗禽流感H5N1病毒活性進(jìn)行了篩選，發(fā)現(xiàn)中藥醉魚草具有較好的抗H5N1病毒活性，其活性部位為正丁醇部位。
　　中藥醉魚草是醉魚草科醉魚草屬落葉灌木醉魚草（Buddleja lindleyana Fort.）的莖和葉，廣泛分布于江蘇、湖北、廣西等地，其花（醉魚草花）和根（醉魚草根）亦供藥用，主治痄腮、瘰疬、陰疽、鉤蟲病、魚骨鯁、風(fēng)寒牙痛等，臨床

3、報(bào)道用于治療支氣管哮喘，具有抑菌殺蟲作用。目前，國內(nèi)外對(duì)其化學(xué)成分研究報(bào)道較少，且尚無抗 H5N1病毒活性研究。本課題對(duì)醉魚草莖葉正丁醇部位進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，并對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行了活性篩選實(shí)驗(yàn)，以期補(bǔ)充其化學(xué)成分研究和尋找其抗H5N1病毒活性成分。
　　本課題在活性追蹤分離方法指導(dǎo)下，通過運(yùn)用AB-8大孔吸附樹脂柱色譜、硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、ODS C18開放柱色譜、制備薄層色譜、HPLC

4、、PHPLC和重結(jié)晶等分離純化技術(shù)，對(duì)醉魚草莖葉正丁醇部位進(jìn)行了系統(tǒng)的分離純化，共分離得到了23個(gè)化合物，通過對(duì)化合物的理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)分析，鑒定了19個(gè)化合物，其中黃酮類化合物11個(gè)，甾體類化合物2個(gè)，三萜類化合物1個(gè)，其他類化合物5個(gè)，分別為：蒙花苷（1），芹菜素-7-O-新橙皮糖苷（2），蘆?。?），橙皮苷（4），芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5），金絲桃苷（6），芹菜素（7），木犀草素（8），橙皮素（9），槲皮素（10

5、），大豆黃素（11），水楊酸（12），紅景天苷（13），丁香酸（14），苯甲酸（15），(Z)-6-二十二烯酰胺（16），齊墩果酸（17），β-谷甾醇（18），胡蘿卜苷（19）。其中，化合物4-6，12-16共8個(gè)化合物為首次從該屬中分離得到，化合物2-3，7-10，17共7個(gè)化合物為首次從該植物中分離得到。
　　通過MTT比色法，對(duì)化合物進(jìn)行了體外抗人乳腺癌細(xì)胞MCF-7、人宮頸癌細(xì)胞Hela和人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29活性評(píng)價(jià)，結(jié)