枸杞子抗阿爾茨海默病活性成分研究.pdf

1、寧夏枸杞是茄科枸杞屬灌木，自然生長于亞洲地區(qū)，主要分布在中國西北部。枸杞子是我國傳統(tǒng)名貴中藥材，始載于神農本草經，被列為上品?！吨腥A人民共和國藥典》2015版規(guī)定，枸杞子（wolfberry。goji berry）為茄科植物寧夏枸杞（Lycium barbarum）的干燥成熟果實，具有滋肝補腎、益精明目的功效。目前，枸杞子作為中藥及功能食品在全世界范圍廣泛使用?，F(xiàn)代藥理學研究表明，枸杞子具有抗氧化、抗衰老、神經保護、抗阿爾茨海默?。ˋl

2、zheimer’s disease。AD）和保肝等藥理活性。大量文獻研究表明了枸杞多糖、多酚及類胡蘿卜素類是枸杞子中的主含活性成分。
　　本論文運用大孔樹脂柱色譜、硅膠柱色譜、ODS柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜以及反相高效液相色譜法等現(xiàn)代色譜學分離手段，對枸杞子60％乙醇提取物進行了系統(tǒng)的化學成分分離，從中共分離得到了83個化合物。通過理化性質、現(xiàn)代波譜學手段（UV、IR、MS、NMR）和化學方法，鑒定了這些化合物的

3、結構，包括15個二咖啡酰亞精胺類衍生物（1?15），15個苯丙酰苯乙胺衍生物（16?30），28個苯丙素類化合物（31?58），4個香豆素類化合物（59?62），8個木脂素類化合物（63?70），5個黃酮類化合物（71?75），3個異黃酮類化合物（76?78），2個綠原酸類衍生物（79和80）和3個苯甲酸類衍生物（81?83）。其中，27個為新化合物，即 lycibarbarspermidines A?O（1?15）、N-(4-O-β-

4、D-glucopyranosyl-cis-feruloyl)-tyramine（16）、(7''S*,8''R*)-canabisine H（25）、lycibarbarphenylpropanoids A?I（31?39）和lycibarbarcoumarin A（59）。29個已知化合物（17?19、24、27、29、30、40?49、54、56?58、64?66、69、70和76?78）首次從枸杞屬植物中分離獲到。本研究首次從枸杞

5、子中分離得到了二咖啡酰亞精胺類衍生物、木脂素和異黃酮類成分。二咖啡酰亞精胺類衍生物是一類稀有的植物次級代謝產物，主要分布在茄科植物中。目前，這類化合物僅鑒定了6個，均為直鏈的非糖苷化產物。本研究所報道的化合物1?15是首例二咖啡酰亞精胺類衍生物糖苷化產物，其中化合物14?15是首次報道的二咖啡酰亞精胺類衍生物環(huán)化產物。通過分析化合物分離純化流程可知，二咖啡酰亞精胺類衍生物是枸杞子中一類主含特征性成分。
　　本課題組前期采用轉基因A

6、D果蠅模型，篩選出枸杞子提取物能顯著性改善果蠅短時學習記憶能力。本研究也采用該模型，對枸杞子提取物大孔樹脂各洗脫餾分進行抗AD活性評價，發(fā)現(xiàn)主要餾分 LBB（大孔樹脂30%乙醇-水洗脫餾分）能顯著性改善果蠅短時學習記憶能力。我們對餾分 LBB進行分離，首次發(fā)現(xiàn)了枸杞子中一類主含特征性成分，二咖啡酰亞精胺類衍生物。同時，我們借助轉基因AD果蠅模型，對主含特征性成分二咖啡酰亞精胺類衍生物進行抗AD活性評價。實驗結果表明，所有二咖啡酰亞精胺類

7、衍生物均不同程度地改善果蠅短時學習記憶能力。因此，二咖啡酰亞精胺類衍生物是枸杞子中一類主含特征性的抗AD活性成分。
　　本研究也采用分子水平篩選模型，如ThT模型、Ellman模型、DPPH自由基清除實驗和oxygen radical absorbance capacity(ORAC)實驗，對枸杞子中所有單體化合物進行體外抗 AD及抗氧化活性評價。實驗結果表明，所有化合物均顯示了不同程度的oxygen radical absorb