AM調(diào)節(jié)潰瘍性結(jié)腸炎腸黏膜通透性的機制及復方苦參湯的干預作用研究.pdf

1、目的：
　　炎癥性腸病是一種容易反復發(fā)作的慢性疾病，病程漫長，常遷延不愈。越來越多的研究表明，免疫調(diào)節(jié)缺陷和腸上皮屏障功能受損是導致結(jié)腸炎發(fā)生的重要環(huán)節(jié)。RhoA的下游效應分子ROCK可以通過使肌球蛋白輕鏈（MLC）磷酸化，產(chǎn)生細胞收縮力，對細胞骨架結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響，而NF-κB p65也參與在MLCK依賴的腸道屏障調(diào)節(jié)過程中。
　　腎上腺髓質(zhì)素（AM）參與了抑制炎癥反應和維護腸道上皮屏障功能等多種生理過程，但具體機制尚不明確，

2、本實驗的研究目的在于探討在結(jié)腸炎大鼠模型中，AM對腸黏膜通透性的影響以及復方苦參湯（Compound Sophorae Flavescentis decoction，CSFD）的干預作用，這對潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機制和治療的研究均具有重要的意義。
　　方法：
　　清潔級雄性SD大鼠32只（180-200g），隨機分成腎上腺髓質(zhì)素組、模型組、正常組和復方苦參湯組4組，每組8只。模型組、復方苦參湯組及腎上腺髓質(zhì)素組均給予TNBS灌腸

3、，以建立潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型。造模后48h，腎上腺髓質(zhì)素組、復方苦參湯組分別給予AM、復方苦參湯1ml/只/天灌腸；而模型組、正常組則給予生理鹽水1ml/只/天灌腸，7天后，麻醉大鼠，留取血液標本，酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清TNF-α，IFN-γ表達的水平。取結(jié)腸組織標本，通過HE染色及組織病理學評分來評估大鼠結(jié)腸組織病理變化，Western Blot測定腸道黏膜RhoA、ROCK1、MLCK、NF-κBp65及緊密連接蛋白Occludin

4、的表達。
　　結(jié)果：
　　TNBS造模后的大鼠體重明顯減輕，行動遲緩，與正常組比較，模型組大鼠血清中TNF-α、IFN-γ的表達明顯增多（p<0.05），結(jié)腸組織中RhoA、ROCK1、NF-κBp65、MLCK蛋白的含量增多（p<0.05），而緊密連接蛋白Occludin的表達較正常組明顯降低（p<0.05）；與模型組比較，給予AM和復方苦參湯治療后的大鼠TNF-α、IFN-γ表達降低（p<0.05），結(jié)腸組織中RhoA、

5、ROCK1、MLCK及NF-κBp65蛋白的表達顯著下降（p<0.05），而緊密連接蛋白Occludin的表達明顯升高（p<0.05）有統(tǒng)計學意義；但腎上腺髓質(zhì)素組和中藥復方苦參湯組之間比較，以上指標的表達無顯著差異（p>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.腎上腺髓質(zhì)素可以緩解TNBS誘導的大鼠腸道炎癥，改善腸道黏膜通透性。
　　2.RhoA介導的NF-κB p65/MLCK信號通路可能參與了潰瘍性結(jié)腸炎的病理過程。