膠質(zhì)瘤干細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化及相關(guān)分子機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：觀察膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（GSCs）與樹突狀細(xì)胞（DC）體外相互作用，并對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞誘導(dǎo)惡性轉(zhuǎn)化的樹突狀細(xì)胞生物學(xué)特征進(jìn)行分析，并比較轉(zhuǎn)化前后的分子差異，為初步探討其分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　方法：取表達(dá)綠色熒光蛋白(EGFP)的小鼠骨髓腔沖洗細(xì)胞，從中誘導(dǎo)培養(yǎng)樹突狀細(xì)胞，然后與表達(dá)紅色熒光蛋白(RFP)的人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞SU3共培養(yǎng),觀察二者間的相互作用，從中單克隆增殖能力強(qiáng)的共表達(dá) EGFP和 RFP雙陽(yáng)性細(xì)胞，檢測(cè)相關(guān)分子標(biāo)志物

2、，并行染色體分析和致瘤試驗(yàn)。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步分析轉(zhuǎn)化的DC與正常DC基因表達(dá)譜水平的差異。
　　結(jié)果：轉(zhuǎn)化的共表達(dá)EGFP和RFP細(xì)胞形態(tài)符合樹突狀細(xì)胞特征，DC標(biāo)志蛋白CD11c、CD80、信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α（SIRP-α）均高表達(dá)，此外表達(dá)鼠源性細(xì)胞標(biāo)志物β-肌動(dòng)蛋白；且兼具高增殖、高侵襲力和強(qiáng)致瘤的能力;染色體核型為異倍體，條數(shù)為93±10條。轉(zhuǎn)化后的DC與正常DC相比，全基因組表達(dá)譜數(shù)據(jù)分析顯示，三倍以上差異變化基因3734