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文檔簡介
1、目的:觀察膠質(zhì)瘤干細胞(GSCs)與樹突狀細胞(DC)體外相互作用,并對膠質(zhì)瘤干細胞誘導(dǎo)惡性轉(zhuǎn)化的樹突狀細胞生物學(xué)特征進行分析,并比較轉(zhuǎn)化前后的分子差異,為初步探討其分子機制奠定基礎(chǔ)。
方法:取表達綠色熒光蛋白(EGFP)的小鼠骨髓腔沖洗細胞,從中誘導(dǎo)培養(yǎng)樹突狀細胞,然后與表達紅色熒光蛋白(RFP)的人膠質(zhì)瘤干細胞SU3共培養(yǎng),觀察二者間的相互作用,從中單克隆增殖能力強的共表達 EGFP和 RFP雙陽性細胞,檢測相關(guān)分子標志物
2、,并行染色體分析和致瘤試驗。在此基礎(chǔ)上,進一步分析轉(zhuǎn)化的DC與正常DC基因表達譜水平的差異。
結(jié)果:轉(zhuǎn)化的共表達EGFP和RFP細胞形態(tài)符合樹突狀細胞特征,DC標志蛋白CD11c、CD80、信號調(diào)節(jié)蛋白α(SIRP-α)均高表達,此外表達鼠源性細胞標志物β-肌動蛋白;且兼具高增殖、高侵襲力和強致瘤的能力;染色體核型為異倍體,條數(shù)為93±10條。轉(zhuǎn)化后的DC與正常DC相比,全基因組表達譜數(shù)據(jù)分析顯示,三倍以上差異變化基因3734
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