鼻咽癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)及其臨床價(jià)值.pdf

1、目的：通過對(duì)鼻咽癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cell，CTC）的檢測(cè)，分析循環(huán)腫瘤細(xì)胞與鼻咽癌患者的原發(fā)灶大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、組織病理類型、疾病進(jìn)展等臨床病理特征間的相關(guān)性，為判斷預(yù)后及治療方案的決策提供一定理論依據(jù)。
　　方法：選自2014年3月至2015年2月于宜昌市中心人民醫(yī)院、葛洲壩中心醫(yī)院、第二人民醫(yī)院、仁和醫(yī)院首次就診的鼻咽癌患者共68例，依據(jù)鼻咽癌2008版TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，I

2、期5例，Ⅱ期12例，Ⅲ期28例，Ⅳa期13例，Ⅳb期10例；其中T1期19例，T2期23例，T3期15例，T4期11例；N0期13例，N1a期8例，N1b期10例，N2期24例，N3期13例；M0期58例，M1期10例。所有患者均經(jīng)病理活檢確診，且TMN分期明確，無其他腫瘤，無活動(dòng)性感染，無肝、腎、心臟等重要器官功能異常。I-Ⅱ期鼻咽癌患者首診時(shí)予以根治性調(diào)強(qiáng)放療，處方劑量為95％PGTVnx=72.6Gy/2.2Gy/f×33F，95

3、%PGTVnd=72.6Gy/2.2Gy/f×33F，95%PTV1=62.04Gy/1.88Gy/f×33F，95%PTV2=56.76Gy/1.72Gy/f×33F；Ⅲ-Ⅳ期患者先予以2周期DF（順鉑，25mg/m2， d1-d3；5-氟脲嘧啶600mg/m2，d1-d5）方案誘導(dǎo)化療，再行根治性調(diào)強(qiáng)放療（方案同上），放療結(jié)束休息1月后，31例患者再接受4周期化療（DF方案或TD方案）。所有患者于臨床治療前抽取外周血7.5ml進(jìn)行C

4、TC檢測(cè)，采用免疫磁珠陰性法富集鼻咽癌患者外周血中的腫瘤細(xì)胞，富集后細(xì)胞涂片，應(yīng)用CD45、CK18、FISH-CEP8及DAPI標(biāo)記細(xì)胞。同時(shí)抽取10例健康人全血標(biāo)本作為CTC檢測(cè)效率的對(duì)照組。
　　結(jié)果：68例鼻咽癌患者外周血中67例檢測(cè)出CTC，檢出率為98.5%，CTC的陽(yáng)性率（CTC≥3為陽(yáng)性）為60.3%（41/68），10例健康人外周血中未檢測(cè)出CTC。依據(jù)TNM分期（Ⅰ-Ⅲ期與Ⅳ期）不同，CTC陽(yáng)性率分別是51.1

5、%（23/45）、78.3%（18/23）， CTC陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.038）；根據(jù)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況（N0、N1、N2、N3期）不同，CTC陽(yáng)性率分別為38.5%（5/13）、55.6%（10/18）、66.7%（16/24）、76.9%（10/13），CTC陽(yáng)性率差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.194）；根據(jù)原發(fā)腫瘤大?。═1、T2、T3、T4期）不同，患者CTC陽(yáng)性率分別為36.8%（7/19）、65.2%（15/23）、

6、73.3%（11/15)、72.7%（8/11），CTC陽(yáng)性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.096）；根據(jù)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況（M0、M1期）不同，CTC陽(yáng)性率分別為55.2%（32/58）、90.0%（9/10）， CTC陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.043）。鼻咽癌患者CTC陽(yáng)性率與患者的性別、年齡、病理分型不存在相關(guān)性。
　　68例鼻咽癌患者檢測(cè)出CTC數(shù)量范圍在0-12個(gè)/7.5ml，平均（4.13±2.51）個(gè)/7.5ml。隨著臨

7、床分期的增加，CTC數(shù)量也隨之增加：Ⅰ-Ⅲ（3.71±2.33）、IV（4.96±2.69），但CTC數(shù)目差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.052）。較于未遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者，CTC數(shù)量在轉(zhuǎn)移患者中明顯增高：M0（3.86±2.36）、M1（5.70±2.91），兩組CTC數(shù)目差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.031）。將患者分為Ⅰ組（CTC＜5）和Ⅱ組（CTC≥5），Ⅰ組晚期（IV期）患者所占比率為23.1%，Ⅱ組晚期（IV期）患者所占比率為48.3

8、%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.04）；Ⅰ組遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（M1）患者所占比率為7.7%，Ⅱ組遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（M1）患者所占比率為24.1%，兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.085）。
　　對(duì)68例鼻咽癌患者進(jìn)行12個(gè)月的隨訪，發(fā)現(xiàn)有17例出現(xiàn)疾病進(jìn)展，1年疾病無進(jìn)展生存率為74.6%。根據(jù)不同分期（Ⅰ-Ⅱ和Ⅲ-Ⅳ期），Ⅰ-Ⅱ期患者中有1例進(jìn)展（5.9%），Ⅲ-Ⅳ期患者有16例進(jìn)展（32.0%），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.05）；CTC陽(yáng)性患者中

9、有14例進(jìn)展（34.1%），CTC陰性患者中有3例進(jìn)展（11.5%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.047）。在Ⅲ-Ⅳ期鼻咽癌患者中，31例接受誘導(dǎo)化療+根治性放療+輔助化療的患者中有5例出現(xiàn)疾病進(jìn)展，疾病進(jìn)展率為16.1%。而19例接受誘導(dǎo)化療+根治性放療的患者中有11例出現(xiàn)疾病進(jìn)展，疾病進(jìn)展率為57.9%；16例疾病進(jìn)展患者中CTC陽(yáng)性患者14例（87.5%），34例無疾病進(jìn)展患者中CTC陽(yáng)性患者21例（61.8%），logistic回

10、歸分析發(fā)現(xiàn)CTC陰/陽(yáng)性、治療方式與疾病進(jìn)展存在相關(guān)性（P<0.05）。在35例CTC陽(yáng)性Ⅲ-Ⅳ期患者中，接受誘導(dǎo)化療+根治性放療患者的疾病進(jìn)展率為83.3%，接受誘導(dǎo)化療+根治性放療+輔助化療患者的疾病進(jìn)展率為17.4%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：1.運(yùn)用免疫染色-熒光原位雜交技術(shù)，可以檢測(cè)到鼻咽癌中循環(huán)腫瘤細(xì)胞。2.本研究發(fā)現(xiàn)鼻咽癌患者CTC的陽(yáng)性率與腫瘤臨床總分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，分期越晚、有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患