苗藥血人參品質(zhì)評價及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)深入研究.pdf

1、目的：通過研究苗藥血人參的總黃酮提取工藝、薄層色譜鑒別和含量測定，從而建立起血人參藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，促進(jìn)該藥用資源的開發(fā)利用。同時，通過分析比較種植和野生的血人參藥材，為該藥材馴化研究提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:
　?。?）通過對血人參總黃酮提取參數(shù)中乙醇濃度、固液比、提取時間及提取次數(shù)進(jìn)行單因素試驗，采用L9(34)正交優(yōu)化試驗法進(jìn)一步優(yōu)化，以總黃酮純度和總黃酮提取率作為考察指標(biāo)。優(yōu)化血人參總黃酮的提取工藝。
　?。?）

2、運(yùn)用半制備高效液相色譜法制備對照品A（schizandriside）和對照品（2α,3α-epoxy-5,7,3′,4′-tetrahydroxyflavan-(4β→8)-epicatechin），建立以原兒茶酸、表兒茶素為參照和以兒茶素以及兩種自制標(biāo)準(zhǔn)品為參照的兩種血人參藥材薄層色譜（TLC）鑒別方法，并對不同產(chǎn)地血人參藥材進(jìn)行鑒定。
　　（3）使用高效液相色譜法（HPLC），建立同時測定血人參藥材中4種指標(biāo)性成分的含量測定方

3、法，并使用該方法測定10批不同產(chǎn)地血人參藥材中4種指標(biāo)性成分的含量。
　　（4）通過優(yōu)化得到的血人參TLC鑒別方法對種植藥材進(jìn)行鑒定；使用優(yōu)化得到的HPLC含量測定方法測定6批種植藥材中4種指標(biāo)性成分含量；對比種植和野生藥材乙酸乙酯萃取層指紋圖譜相似度，分析種植和野生血人參藥材之間的差異，對馴化血人參藥材進(jìn)行品質(zhì)評價。
　　結(jié)果：
　?。?）經(jīng)過正交試驗得出的最佳工藝條件為：乙醇濃度50％，固液比l∶30，提取時間1.

4、5h，水浴回流提取2次，在此條件下血人參總黃酮的平均提取率為7.42mg/g。
　?。?）經(jīng)檢測自制的兩種化合物純度≥98%、在6個月內(nèi)穩(wěn)定，達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)；所建立兩種血人參藥材的TLC鑒別方法分別為：①以原兒茶酸、表兒茶素為對照，純水加熱回流提取1h的血人參藥材為供試品，GF254高效板上以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(50:55:15)為展開劑，展開兩次，碘顯色后可見光下檢視；②以兒茶素、對照品A、對照品B為對照，純甲醇回流提取1h的血

5、人參藥材為供試品，GF254高效板上以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(100:50:15)為展開劑，展開兩次，碘顯色后可見光下檢視，經(jīng)方法學(xué)考察以上兩種方法特征性強(qiáng)，穩(wěn)定性、重復(fù)性和重現(xiàn)性良好。
　?。?）建立的血人參藥材中4種指標(biāo)性成分的測定方法下兒茶素線性范圍為1.28～8.96μg（r=0.9995），平均回收率為101.23%，RSD為1.51%；表兒茶素線性范圍為1.15～8.05μg(r=0.9999），平均回收率為99.49%

6、，RSD為2.18%；對照品A線性范圍為0.83～4.98μg（r=0.9999），平均回收率為101.88%，RSD為3.35%；對照品B線性范圍為0.83～5.81μg（r=0.9999）平均回收率為101.46%，RSD為3.02%，所測定的10批不同產(chǎn)地、不同采收時間的樣品4組分含量范圍分別為兒茶素:0.4421～0.5028mg/g；表兒茶素0.6063～0.8382mg/g；對照品A：0.8422～1.0160mg/g；對照

7、品B:0.3092～0.5093mg/g，經(jīng)考察該方法結(jié)果準(zhǔn)確、科學(xué)可行、簡單方便，
　?。?）通過TLC法比較，種植血人參藥材均能在標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)位置找到相同色譜斑點(diǎn)；通過測定，種植血人參藥材中4中指標(biāo)性成分含量為兒茶素：1.2917～1.4050mg/g，平均含量1.3604mg/g，RSD：3.52%；表兒茶素：1.4234～1.4631mg/g，平均含量1.4422mg/g，RSD：1.32%；對照品A：1.3958～1.55

8、45mg/g，平均含量1.4469mg/g，RSD：4.02%；對照品B：0.3520～0.4587mg/g，平均含量0.3901，RSD：3.18%，除對照品B外其余3個指標(biāo)性成分含量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于野生藥材；6批種植藥材與野生藥材乙酸乙酯萃取層指紋圖譜共有模式相似度為0.972～1.000，共有的16個峰的平均峰面積總和為種植：38153.47、野生：19715.87，種植藥材品質(zhì)高于野生藥材。
　　結(jié)論：本研究填補(bǔ)了血人參藥材總黃