壯藥白金顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、目的:本研究通過對(duì)壯藥白金顆粒性狀、鑒別檢查及標(biāo)志性成分總黃酮和薯蕷皂苷元含量等項(xiàng)目進(jìn)行考察研究，起草壯藥白金顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為全面有效地控制壯藥白金顆粒的質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù);并通過對(duì)壯藥白金顆粒的穩(wěn)定性進(jìn)行初步考察，為壯藥白金顆粒制劑的生產(chǎn)、包裝、貯存和有效期的確定提供依據(jù)，保障其在臨床應(yīng)用上的安全性和有效性。
　　方法:
　　1.開展性狀考察通過考察三批中試生產(chǎn)的壯藥白金顆粒的外觀性狀，聞其氣味、嘗其味道，觀其顏色與狀態(tài)。

2、
　　2.開展鑒別檢查采用薄層色譜法對(duì)壯藥白金顆粒中金剛刺的薯蕷皂苷元進(jìn)行薄層定性鑒別，展開系統(tǒng):環(huán)己烷-乙酸乙酯=4∶1。
　　3.參照《中國(guó)藥典》2010版一部附錄IC顆粒劑通則檢查，對(duì)壯藥白金顆粒制劑進(jìn)行檢查項(xiàng)目研究，包括粒度、水分、溶化性、裝量差異、微生物限度;此外，還進(jìn)行重金屬及砷鹽檢查。
　　4.建立壯藥白金顆粒中的總黃酮含量測(cè)定方法開展總黃酮測(cè)定的方法學(xué)考察研究，分別對(duì)蘆丁的線性關(guān)系、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定

3、性、加樣回收試驗(yàn)及樣品的總黃酮含量測(cè)定進(jìn)行考察。
　　5.建立HPLC法測(cè)定壯藥白金顆粒中薯蕷皂苷元的含量測(cè)定方法用GL Sciences Inc.C18色譜柱（ODS-3，250×4.6mm，5μm）;流動(dòng)相:甲醇-水(89∶11);檢測(cè)波長(zhǎng):203nm;流速:1mL/min;柱溫:35℃;進(jìn)樣量:30μL。開展了薯蕷皂苷元含量測(cè)定的方法學(xué)考察研究，分別對(duì)薯蕷皂苷元的線性關(guān)系、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、加樣回收試驗(yàn)及樣品的薯蕷皂苷

4、元含量測(cè)定進(jìn)行考察。
　　6.建立壯藥白金顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案，并進(jìn)行起草說明。
　　7.根據(jù)壯藥白金顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案，采用在GMP條件下生產(chǎn)的三批壯藥白金顆粒中試樣品，以模擬市售包裝條件進(jìn)行下列穩(wěn)定性研究。
　　(1)影響因素試驗(yàn):供試品分別在高溫(60℃)、高濕（相對(duì)濕度為92.5％±5％）、強(qiáng)光（4500LX±500LX）照射條件下放置10天，于第5天和第10天取樣，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目，考察壯藥白金顆粒制劑的穩(wěn)

5、定性情況。
　　(2)加速穩(wěn)定性試驗(yàn):供試品在綜合藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱中，40℃±2℃、相對(duì)濕度為75％±5％條件下進(jìn)行試驗(yàn)，在試驗(yàn)期間0個(gè)月、1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月取樣檢測(cè)。
　　(3)長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn):在模擬市售包裝條件下，供試品在實(shí)際貯存條件下，分別于0個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月取樣檢測(cè)。
　　結(jié)果:
　　1.壯藥白金顆粒的性狀為淺紅棕色至深紅棕色的顆粒，氣芳香，味苦，微澀，吞咽后略甘甜。

6、r>　　2.供試品色譜中，在與薯蕷皂苷元對(duì)照品色譜及菝葜對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照色譜在相應(yīng)的位置上無斑點(diǎn)。
　　3.參照《中國(guó)藥典》2010版一部附錄IC顆粒劑通則檢查，壯藥白金顆粒劑的粒度平均百分比為8.04％;水分平均含水量為2.19％;溶化性觀察情況顯示全部溶化，有輕微渾濁;裝量差異實(shí)測(cè)范圍在4.9732～5.0337g之間;微生物限度檢查中細(xì)菌在120～140cfu/g之間、霉菌和酵母菌在10～

7、20 cfu/g之間、大腸埃希菌未檢出;參照《中國(guó)藥典》2010版一部附錄Ⅸ項(xiàng)下重金屬限度及砷鹽限度檢查，壯藥白金顆粒劑的重金屬＜10ppm，砷鹽＜1ppm。
　　4.蘆丁的濃度在4.2μg/mL-117.6μg/mL之間與吸光度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系;在精密度試驗(yàn)中，平均蘆丁含量為4.27mg，RSD=0.45％;在重復(fù)性試驗(yàn)中，平均總黃酮含量為93.30mg/g，RSD=2.24％;在穩(wěn)定性試驗(yàn)中，平均總黃酮含量為89.61mg/

8、g，RSD=2.40％;加樣回收率平均值為99.48％，RSD=2.34％。
　　5.HPLC法測(cè)定壯藥白金顆粒薯蕷皂苷元含量中，薯蕷皂苷元進(jìn)樣量在0.24μg-7.2μg之間與峰面積積分值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系;在精密度試驗(yàn)中，平均薯蕷皂苷元含量為0.4194mg/g，RSD=1.38％;在重復(fù)性試驗(yàn)中，平均薯蕷皂苷元含量為0.4241mg/g，RSD=1.46％;在穩(wěn)定性試驗(yàn)中，平均薯蕷皂苷元含量為0.4266mg/g，RSD=1

9、.35％;在加樣回收試驗(yàn)中，加樣回收率平均值為101.11％，RSD=2.68％。
　　6.起草的壯藥白金顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，其檢測(cè)項(xiàng)目有:性狀，鑒別，檢查（粒度、水分、溶化性、裝量差異、微生物限度、重金屬和砷鹽），含量測(cè)定。
　　7.穩(wěn)定性考察結(jié)果:
　　(1)影響因素試驗(yàn):
　　高溫(60℃)因素:供試品于第5、10天的性狀、總黃酮含量、薯蕷皂苷元含量、薄層鑒別、粒度、水分、溶化性，與0天相比，無顯著性差異。

10、r>　　高濕（92.5％±5％）因素:供試品于第5、10天的性狀、總黃酮含量、薯蕷皂苷元含量、薄層鑒別、粒度、溶化性，與0天相比，無顯著性差異。
　　強(qiáng)光（4500LX±500LX）照射因素:供試品于第5、10天的性狀、總黃酮含量、薯蕷皂苷元含量、薄層鑒別、粒度、溶化性，與0天相比，無顯著性差異。
　　(2)加速穩(wěn)定性試驗(yàn):
　　供試品于第1、2、3、6個(gè)月的性狀、總黃酮含量、薯蕷皂苷元含量、薄層鑒別、粒度、溶化性、微

11、生物限度、裝量差異，與0個(gè)月相比，無顯著性差異。
　　(3)長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn):
　　供試品于第3、6個(gè)月的性狀、總黃酮含量、薯蕷皂苷元含量、薄層鑒別、粒度、溶化性、微生物限度、裝量差異，與0個(gè)月相比，無顯著性差異。
　　結(jié)論:
　　本研究所確立的金剛刺的薄層定性鑒別方法和總黃酮含量、薯蕷皂苷元含量的測(cè)定方法，準(zhǔn)確度好、專屬性強(qiáng)、重復(fù)性好、精密度高、方法簡(jiǎn)便，可以有效控制壯藥白金顆粒制劑的質(zhì)量。通過對(duì)壯藥白金顆粒制劑