頸復(fù)康顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、近年來,隨著人們對(duì)西藥局限性認(rèn)識(shí)的深入和世界范圍內(nèi)“回歸自然”的興起,特別是隨著人類的醫(yī)學(xué)模式由單純的治療疾病向預(yù)防、保健、治療、康復(fù)相結(jié)合的模式轉(zhuǎn)變,天然藥物及中藥越來越受到人們的普遍重視,頸復(fù)康顆粒就是在這一背景下煥發(fā)了活力。中藥是中華民族的瑰寶,對(duì)其建立既符合我國中醫(yī)藥特色、又能讓國際社會(huì)認(rèn)可的中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系,是我國實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化、走向國際市場(chǎng)的關(guān)鍵所在。
　　頸復(fù)康顆粒由羌活、川芎、葛根、秦艽、威靈仙、蒼術(shù)、丹參、白芍、

2、地龍(酒炙)、紅花、乳香(制)、黃芪、黨參、地黃、石決明、煅花蕊石、關(guān)黃柏、炒王不留行、燀桃仁、沒藥(制)、土鱉蟲(酒炙)21味中藥組成,具有活血通絡(luò)、散風(fēng)止痛的功效,對(duì)頸椎病引起的腦供血不足,頭暈,頸項(xiàng)僵硬,肩背酸痛,手臂麻木等癥具有明顯療效,總有效率90％以上,是治療頸椎病的首選藥物。上市二十多年以來,以其確切的療效和明顯的治療特點(diǎn)贏得廣大消費(fèi)者的認(rèn)可,是頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司的獨(dú)家品種,國家秘密技術(shù)項(xiàng)目,國家中藥保護(hù)品種,是中國中

3、藥名牌產(chǎn)品和國家中藥現(xiàn)代化高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化示范工程產(chǎn)品,收載于2005版、2010版《中國藥典》。
　　當(dāng)前國內(nèi)大復(fù)方制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)整體有待提高。頸復(fù)康顆粒是由二十一味中藥組成的大復(fù)方制劑,現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)2010版中國藥典中,規(guī)定了頸復(fù)康顆粒中黃芪、丹參、關(guān)黃柏、白芍的鑒別和葛根素的含量方法。對(duì)其質(zhì)量方法進(jìn)行研究,既能提高自身的質(zhì)量控制水平,也能對(duì)其他大品種制劑的質(zhì)量控制研究提供借鑒。
　　處方中的秦艽祛風(fēng)除濕,舒筋活絡(luò),止痛。羌

4、活祛風(fēng)勝濕,散寒止痛。二者在方中有重要作用,因此本研究對(duì)兩種藥材進(jìn)行薄層鑒別方法研究;處方中的白芍補(bǔ)中益氣,扶正祛邪。但目前市場(chǎng)上白芍的質(zhì)量差異較大,認(rèn)為需要增加制劑中的含量測(cè)定以保證藥品質(zhì)量;處方中的乳香活血化瘀,通絡(luò)止痛,需要增加制劑中的乙酸辛酯的含量測(cè)定方法以對(duì)揮發(fā)油和乳香的質(zhì)量進(jìn)行控制。
　　整個(gè)研究對(duì)提高頸復(fù)康顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),提高整體質(zhì)量控制水平,保證藥物療效穩(wěn)定起到積極作用。
　　目的:
　　1、采用薄層色譜

5、法分析建立頸復(fù)康顆粒中羌活、秦艽的薄層色譜鑒別方法,增加2味中藥的薄層色譜法鑒別檢測(cè)項(xiàng)目,以期控制頸復(fù)康顆粒的生產(chǎn)過程,為頸復(fù)康顆粒增加定性鑒別提供依據(jù)。
　　2、采用HPLC色譜法,研究建立頸復(fù)康顆粒中芍藥苷的含量測(cè)定方法,以測(cè)定頸復(fù)康顆粒中芍藥藥材的轉(zhuǎn)移率,為制定頸復(fù)康顆粒中芍藥苷含量測(cè)定方法和含量限度提供基礎(chǔ)和依據(jù)。
　　3、采用氣相色譜法,研究建立頸復(fù)康顆粒中乙酸辛酯的含量測(cè)定方法,以測(cè)定頸復(fù)康顆粒中乳香藥材的轉(zhuǎn)移率

6、,為制定頸復(fù)康顆粒乙酸辛酯的含量測(cè)定方法和含量限度,為進(jìn)一步研究控制揮發(fā)油的含量提供試驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　1、采用硅膠H薄層板,以三氯甲烷-甲醇-氨水(7:2:0.5)為展開劑展開,對(duì)處方中的羌活藥材進(jìn)行定性鑒別;采用硅膠GF254薄層板,以三氯甲烷-甲醇-水(8:2:0.1)為展開劑,對(duì)處方中的秦艽藥材進(jìn)行定性鑒別。
　　2、采用Agilent C18(5μm,4.6mm×250mm)色譜柱,乙腈-0.1%磷酸

7、(14:86)為流動(dòng)相;以230 nm為檢測(cè)波長;流速1 mL·min-1;柱溫25℃;進(jìn)樣量10μL的色譜條件,測(cè)定頸復(fù)康顆粒中芍藥的含量。
　　3、采用氣相色譜法,FID檢測(cè)器,HP-5(30m×0.32mm×0.25μm)毛細(xì)管柱。色譜條件:進(jìn)樣口溫度220℃,檢測(cè)器溫度260℃,載氣為氮?dú)?柱流量2mL/min,進(jìn)樣量1μL,分流比20:1。升溫程序:初始溫度80℃,保持2分鐘,以每分鐘10℃的速率升溫至200℃,保持10

8、分鐘。檢測(cè)頸復(fù)康顆粒中乙酸辛酯的含量。
　　結(jié)果:
　　1、薄層色譜法展開效果較好,斑點(diǎn)清晰,分離度理想,陰性對(duì)照無干擾。羌活鑒別實(shí)驗(yàn)中紫花前胡苷Rf值為0.45,秦艽鑒別實(shí)驗(yàn)中龍膽苦苷Rf值為0.50。薄層色譜法鑒別羌活、秦艽效果直觀顯著。
　　2、HPLC色譜法所建立的芍藥苷含量方法,線性范圍為0.01613～0.4896mg·mL-1,r=0.9999,平均加樣回收率為99.7%,RSD=1.26%(n=9),重

9、復(fù)性RSD=1.08%（n=9)。最低檢測(cè)限為4.938ng。12批頸復(fù)康顆粒中芍藥苷的含量在1.81～3.47mg/g。
　　3、GC法建立的頸復(fù)康顆粒中揮發(fā)性成分乙酸辛酯的含量測(cè)定方法,乙酸辛酯含量測(cè)定線性范圍為0.1565~7.824 mg·mL-1,r=0.9999,平均加樣回收率為100.00%,RSD=1.91%(n=9),最低檢測(cè)限為1.6336ng。6批頸復(fù)康顆粒中乙酸辛酯的含量在0.1803～0.3624mg/g

10、。
　　結(jié)論:
　　1、采用薄層色譜法鑒別頸復(fù)康顆粒中的羌活、秦艽,操作簡便、斑點(diǎn)清晰易辨認(rèn),能簡便準(zhǔn)確的定性鑒別處方中所含的上述藥材,具有較好的實(shí)用性,可作為頸復(fù)康顆粒的鑒別方法。
　　2、所建立的高效液相色譜法測(cè)定頸復(fù)康顆粒中芍藥苷的含量,按現(xiàn)行工藝制備的空白陰性樣品無干擾,專屬性強(qiáng);通過方法的優(yōu)化,所建立的方法操作簡便準(zhǔn)確,重現(xiàn)性好,對(duì)不同年份、不同批號(hào)的頸復(fù)康顆粒多批數(shù)據(jù)檢測(cè),為制定頸復(fù)康顆粒中芍藥苷的含量測(cè)定