MiRNA-320d及其靶基因在脊索瘤中的表達(dá)和臨床意義.pdf

1、第一部分、MiRNA-320d在脊索瘤中的表達(dá)及其臨床意義
　　目的：脊索瘤是一種好發(fā)于脊柱兩端的原發(fā)性惡性骨腫瘤，對(duì)傳統(tǒng)放療和化療敏感性低，經(jīng)手術(shù)切除后仍有較高的復(fù)發(fā)率。近年來，研究miRNAs的生物特性及其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的機(jī)制已逐漸成為治療腫瘤的新方向。本課題旨在研究miRNA-320d在脊索瘤中的表達(dá)情況及其與侵襲、復(fù)發(fā)等臨床病理因素的關(guān)系，為脊索瘤的預(yù)后判斷及分子靶向治療提供參考依據(jù)。
　　方法：利用RT-PCR檢

2、測(cè)25例脊索瘤標(biāo)本和10例胎兒髓核組織標(biāo)本中miRNA-320d的相對(duì)表達(dá)量，進(jìn)一步分析miRNA-320d與脊索瘤患者臨床病理因素之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：RT-PCR結(jié)果顯示，脊索瘤組miRNA-320d的表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組，差異具有顯著性意義（p=0.026），卡方檢驗(yàn)結(jié)果顯示miRNA-320d低表達(dá)與脊索瘤的侵襲和復(fù)發(fā)呈顯著相關(guān)（p=0.045，p=0.021），而與患者年齡、性別、腫瘤大小及位置無關(guān)（p＞0.05）。

3、生存分析結(jié)果顯示miRNA-320d低表達(dá)患者持續(xù)無復(fù)發(fā)生存期（Recurrence Free Survial，RFS）短于高表達(dá)患者（p=0.034）。
　　結(jié)論：MiRNA-320d在脊索瘤中呈低表達(dá)，且與脊索瘤的侵襲和復(fù)發(fā)明顯相關(guān)。MiRNA-320d有可能成為脊索瘤患者復(fù)發(fā)和預(yù)后的檢測(cè)指標(biāo)。
　　第二部分、MiRNA-320d脊索瘤相關(guān)靶基因的初步驗(yàn)證及其臨床意義
　　目的：脊索瘤是一種少見的來源于胚胎殘余脊索

4、組織的惡性骨腫瘤。本實(shí)驗(yàn)旨在探索miRNA-320d的潛在靶基因，并研究其在脊索瘤中的表達(dá)及其臨床意義，為脊索瘤的預(yù)后判斷及分子靶向治療提供參考依據(jù)。
　　方法：通過生物信息學(xué)預(yù)測(cè)miRNA-320d的潛在靶基因。利用免疫組化染色法測(cè)定25例骶骨脊索瘤標(biāo)本和10例胎兒髓核組織標(biāo)本中 NRP1的表達(dá)，同時(shí)通過western-blot測(cè)定脊索瘤標(biāo)本和髓核標(biāo)本中NRP1蛋白的表達(dá)情況。并且進(jìn)一步分析NRP1表達(dá)情況與miRNA-320d

5、表達(dá)量的相關(guān)性，以及NRP1與臨床因素及患者預(yù)后之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：生物信息學(xué)預(yù)測(cè)結(jié)果顯示，NRP1是miRNA-320d重要的潛在靶基因。免疫組化結(jié)果顯示骶骨脊索瘤組織中NRP1的陽性表達(dá)率為76.0％（19/25），而胎兒髓核組織的陽性表達(dá)率為20.0%(2/10)，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.006)。Western-blot結(jié)果顯示NRP1蛋白在脊索瘤中的表達(dá)水平明顯高于胎兒髓核組織。直線相關(guān)性分析顯示NRP1蛋白