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文檔簡介
1、分類號:密級:UDC:學號:416522813645南昌大學專業(yè)學位碩士研究生學位論文C57BL6小鼠小鼠EAE模型模型CNS中IBA1、IL10及IL1β的動態(tài)表達及其發(fā)病機制的探討的動態(tài)表達及其發(fā)病機制的探討ExplationoftheIBA1IL10IL1βCNSdynamicexpressionpathogenesisofEAEmodelofC57BL6mice曾紅培養(yǎng)單位(院、系):江西省人民醫(yī)院指導教師姓名、職稱:吳曉牧教授
2、主任醫(yī)師申請學位的學科門類:醫(yī)學學科專業(yè)名稱:神經病學論文答辯日期:2016年5月30日答辯委員會主席:評閱人:2016年5月30日摘要II摘要目的目的:建立MOG3555的C57BL6小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎(ExperimentalAutoimmuneEncephalomyelitis,EAE)模型,檢測其發(fā)病早期(第7天),發(fā)病高峰期(第15天)和恢復期(第28天)時腦組織中與免疫調節(jié)相關的小膠質細胞(IBA1)、各時期促炎因
3、子(如IL1β)及抗炎因子(如IL10)的表達的動態(tài)變化,神經功能評分和體重計數變化。本實驗初步探討了EAE腦脊髓組織內的小膠質細胞免疫相關的作用;觀察各個發(fā)病時期EAE腦組織病理學,免疫學水平的動態(tài)變化;進一步探討EAE的發(fā)病機制,為中樞神經系統(tǒng)脫髓鞘疾病的發(fā)病機制及尋求新的治療方法提供進一步的實驗依據。方法:方法:1、將30只8周齡(體重1520g)C57BL6雌性小鼠隨機分成正常對照組和EAE組,其中21只小鼠建立EAE模型,采用
4、第0天皮下注射200ug的MOG混合劑(MOG3555和CFA在真空中按1:1混合制成混合劑)分別于第0天和第2天腹腔注射200ng的PTX,正常組9只注射同等計量的PBS。對正常組及免疫后的EAE組的小鼠每天采取神經功能評分和體重的測量。2、分別在免疫后的第5天,第15天和第28天發(fā)病階段取其腦脊髓組織制成連續(xù)石蠟切片,并進行HE染色,LuxolFastBlueEosin雙染,觀察其炎癥細胞和髓鞘脫失情況。3、免疫組化法測定腦脊髓組織
5、小膠質細胞標志物(IBA1)、免疫因子白介素因子10(IL10)、白介素因子(IL1β)的表達。結果結果:1、MOG3555多肽誘導模型C57BL6小鼠的一般情況及神經功能評分MOG誘導小鼠免疫平均5.021.54天煩躁,消瘦,末尾張力消失,隨后后肢無力,后肢麻痹等癥狀。平均臨床評分為2.161.42分,第15天發(fā)病癥狀呈持續(xù)性且最嚴重,沒有顯著緩解,為疾病高峰期。癥狀28天之后稍微降低,但仍然輕度神經功能缺損。實驗對照組和對照組中顯著
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