同型半胱氨酸與原發(fā)性開角型青光眼小梁網(wǎng)功能的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：研究同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）對人眼小梁細(xì)胞（Human Trabecular Meshwork cells，HTMCs）的氧化應(yīng)激狀態(tài)及功能障礙的影響，探討Hcy介導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)在原發(fā)性開角型青光眼（Primary Open-angle glaucoma， POAG）發(fā)病機(jī)制中的作用，為POAG的早期診斷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：（1）收集 POAG患者及老年性白內(nèi)障患者的血漿及房水，通過循環(huán)酶法分

2、別測定血漿、房水 Hcy的濃度；（2）將正常人眼小梁網(wǎng)細(xì)胞傳至4-6代后隨機(jī)分為5組?？瞻讓φ战M：正常培養(yǎng)的 HTMCs，實(shí)驗(yàn)組：正常培養(yǎng)的HTMCs+Hcy（Hcy濃度分別為30μmol/L、100μmol/L、300μmol/L、1000μmol/L）。通過CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測小梁網(wǎng)細(xì)胞活性，JC-1染色法檢測小梁細(xì)胞的線粒體膜電位，流式細(xì)胞術(shù)檢測小梁網(wǎng)細(xì)胞內(nèi)ROS的釋放，Western blot檢測SOD1的表達(dá)。
　　結(jié)果：

3、（1）POAG組的血漿、房水中Hcy濃度（14.44±0.86、1.603±0.27μmol/L）均高于老年性白內(nèi)障組（10.82±0.29、0.686±0.39μmol/L），P＜0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；（2）與對照組相比，不同濃度Hcy組HTMCs細(xì)胞增殖均受到抑制，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.001）；（3）不同濃度Hcy處理組間隨Hcy濃度增加線粒體膜電位降低、ROS生成增多、SOD1表達(dá)減少，不同濃度組之間差異均有顯著性差異