無敵藥酒與無敵丹膠囊質(zhì)量控制方法研究.pdf

1、無敵藥酒由黃芪、當(dāng)歸、熟地黃、赤芍、龍血竭、人參、川芎、肉蓯蓉等39味藥組成，收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)第19冊(cè)，標(biāo)準(zhǔn)僅收載桂皮醛、川芎薄層鑒別和檢查項(xiàng)，無含量測(cè)定項(xiàng);無敵丹膠囊由黃芪、杜仲、肉蓯蓉、川芎、龍血竭、三七等20味藥組成，收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)第20冊(cè)，標(biāo)準(zhǔn)僅收載性狀、鑒別與檢查項(xiàng)。無敵藥酒與無敵丹膠囊，有氣血雙補(bǔ)、滋肝補(bǔ)腎、強(qiáng)筋健骨、止痛消腫、祛風(fēng)除濕等功效，主要用于肝腎不足引起的骨性關(guān)節(jié)炎，急、慢性扭挫傷，老年體虛，腰酸腿痛等。

2、目前關(guān)于無敵藥酒與無敵丹膠囊質(zhì)量控制方法的研究較少，因此建立對(duì)其的質(zhì)量控制方法至關(guān)重要。龍血竭為無敵藥酒和無敵丹膠囊中的主要藥味，系百合科龍血樹屬植物劍葉龍血樹Dracaena cochinchinensi s(Lour.)S.C.Chen的含脂木材經(jīng)提取得到的樹脂，有散瘀活血、斂瘡生肌等功效。作為進(jìn)口血竭的代用品，自20世紀(jì)90年代正式定名后應(yīng)用廣泛，自然資源日益匱乏，龍血樹已被國(guó)家列入二級(jí)珍稀瀕危保護(hù)植物。龍血竭中含有多種化學(xué)成分，

3、如酚類，酯類，黃酮類，皂苷類等，其中二氫查耳酮類成分是其活血化瘀的主要有效成分，代表化合物為龍血素A、龍血素B。本研究建立了無敵藥酒中黃芪、赤芍、人參的薄層鑒別方法和高效液相色譜法測(cè)定龍血竭中龍血素A、龍血素B的含量測(cè)定方法;建立了無敵丹膠囊中三七的薄層鑒別方法，龍血竭中龍血素A、龍血素B的高效液相色譜含量測(cè)定方法及龍血竭的特征圖譜研究方法，并針對(duì)近年來市場(chǎng)上的三七摻偽現(xiàn)象特別是用三七莖葉替代三七投料情況，建立了考察膠囊中三七質(zhì)量的超高

4、效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜研究方法，重點(diǎn)考察了三七中是否非法添加三七莖葉情況。為此兩種中成藥的質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)。
　　第一部分 無敵藥酒質(zhì)量控制方法研究
　　目的:建立無敵藥酒的質(zhì)量控制方法。
　　方法:薄層色譜法鑒別無敵藥酒中的黃芪、赤芍、人參;高效液相色譜法測(cè)定龍血竭中龍血素A和龍血素B的含量，色譜柱為Boston GreenODS C18(4.6×250mm;5μm)，乙腈-0.1％磷酸溶液梯度洗脫，流速為1.0

5、mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為278 nm，柱溫為30℃。
　　結(jié)果:薄層色譜鑒別，在與黃芪對(duì)照藥材、黃芪甲苷對(duì)照品、赤芍對(duì)照藥材、芍藥苷對(duì)照品、人參對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定研究中，龍血素A在0.02168～2.1680μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，回歸方程為Y=76.7149X+0.3893，R2=0.9999，龍血素B在0.01038～1.0380μg/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，回歸方程為Y=55.071

6、4X+0.1357，R2=0.9998，方法重復(fù)性、精密度、穩(wěn)定性、耐用性良好，回收率在99～101％，RSD＜2％。
　　結(jié)論:本研究中建立的方法專屬性良好，能較好地控制本品的質(zhì)量。
　　第二部分 無敵丹膠囊質(zhì)量控制方法研究
　　目的:建立無敵丹膠囊的質(zhì)量控制方法。
　　方法:薄層色譜法鑒別無敵丹膠囊中的三七;高效液相色譜法測(cè)定龍血竭中龍血素A和龍血素B的含量，色譜柱為Boston Green ODS C18(

7、4.6×250mm;5μm)，乙腈-0.1％磷酸溶液等度洗脫，流速為1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為278nm，柱溫為30℃。高效液相色譜法進(jìn)行無敵丹膠囊特征圖譜研究，色譜柱為Thermo AcclaimTM120 C18(4.6×250mm;5μm)，乙腈-0.1％磷酸溶液梯度洗脫，流速為1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為278 nm，柱溫為40℃。超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)三七中非法添加三七莖葉情況進(jìn)行研究，色譜柱為Waters

8、 BEH C18（1.7μm，2.1×100 mm），乙腈-水梯度洗脫，流速為0.5mL·min-1，柱溫為40℃;質(zhì)譜條件離子源為電噴霧離子源（ESI源），監(jiān)測(cè)模式為負(fù)離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，脫溶劑氣溫度為500℃，毛細(xì)管電壓:3.10kV，錐孔電壓:60V。
　　結(jié)果:薄層色譜鑒別，在與三七皂苷R1對(duì)照品、三七對(duì)照藥材相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。龍血素A在2.17～216.80μg/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，回歸方程為Y=0.

9、7671X+0.3893，R2=0.9999，龍血素B在1.04～103.80μg/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，回歸方程為Y=0.5507X+0.1357，R2=0.9998，方法重復(fù)性、精密度、穩(wěn)定性、耐用性良好，回收率在98～101％，RSD＜2％。建立了無敵丹膠囊中龍血竭的特征圖譜，共有8個(gè)特征峰，相似度在0.9以上。建立了三七中非法添加三七莖葉情況的UPLC-MS測(cè)定方法，經(jīng)檢測(cè)，無敵膠囊中三七未發(fā)現(xiàn)非法添加三七莖葉情況。