復方扶芳藤膠囊質量控制方法研究.pdf

1、目的：研究建立復方扶芳藤膠囊成品、中間體有效部位及各組方藥材的HPLC-ELSD指紋圖譜質量控制方法，并對復方扶芳藤膠囊成品及中間體的有效部位和各組方藥材相應部位的指紋圖譜進行了相關性研究；研究建立復方扶芳藤膠囊中主要有效成分人參皂苷Rb1、黃芪甲苷和衛(wèi)矛醇的含量測定方法；通過建立指紋圖譜結合有效成分含量測定的質量控制方法，以達到更有效地控制復方扶芳藤膠囊質量的目的。
　　方法：（1）指紋圖譜測定采用高效液相色譜法，色譜柱：島津S

2、him-Pack CLC-ODS(6.0mmID×150mm)；柱溫：25℃；流動相：A乙腈-B水，梯度洗脫；流速：1.0ml/min；檢測器：蒸發(fā)光散射檢測器（蒸發(fā)溫度：115℃；霧化溫度：80℃，氣體流速：1.1L/min）；進樣量：15μl；分析時間：65min；以保留時間與人參皂苷Rb1一致的色譜峰為參照峰，測定了10批復方扶芳藤膠囊成品及水提物中間體、醇提物中間體有效部位的HPLC-ELSD指紋圖譜；利用國家藥典委員會開發(fā)的中

3、藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)（藥典2004A版）進行相似度計算，分別建立了成品、中間體與藥材主要有效部位的HPLC指紋圖譜共有模式；通過對復方扶芳藤膠囊成品有效部位與中間體、處方各藥材相應部位指紋圖譜色譜峰的相關性進行研究，對成品有效部位指紋圖譜的色譜峰歸屬進行了分析。
　?。?）采用RP-HPLC-ELSD法同時測定了復方扶芳藤膠囊中人參皂苷 Rb1和黃芪甲苷的含量。色譜條件：色譜柱：日本島津 Shim-Pack CLC-ODS

4、(6.0 mmID×150mm)；流動相：A乙腈-B水，梯度洗脫；流速1.0ml/min；柱溫為25℃；分析時間：65min；檢測器：蒸發(fā)光散射檢測器（蒸發(fā)溫度115℃，霧化溫度80℃，氣體流速為：1.1 L/min）。
　?。?）采用正相色譜法測定了復方扶芳藤膠囊中衛(wèi)矛醇的含量。色譜條件：色譜柱為Lichrospher5-NH2柱(150 mm×4.6 mm,5μm)；流動相為乙腈-水(90︰10)；流速1.0ml/min；柱溫

5、為28℃；檢測器為蒸發(fā)光散射檢測器（蒸發(fā)溫度65℃，霧化溫度50℃，氣體流速為：0.9 L/min）。
　　結果：（1）建立的復方扶芳藤膠囊成品 HPLC指紋圖譜共標定了19個共有峰，十批成品的相似度為0.947-0.998；水提物中間體 HPLC指紋圖譜標定了15個共有峰，十批次的相似度為0.990-0.998；醇提物中間體HPLC指紋圖譜標定了9個共有峰，十批次的相似度為0.999-1.00。建立的復方扶芳藤膠囊HPLC指紋圖

6、譜共有模式應用于20批不同質量的成品分析，結果表明所建立的共有模式可初步區(qū)分質量不同的復方扶芳藤膠囊產品；對成品指紋圖譜中的14個色譜峰進行了歸屬分析，確定其主要來源于黃芪和人參。
　?。?）本研究建立的RP-HPLC-ELSD法可同時測定復方扶芳藤膠囊中人參皂苷Rb1和黃芪甲苷的含量，結果表明：人參皂苷Rb1和黃芪甲苷分別在2.78～16.68μg，6.44～38.64μg范圍內成良好線性關系，平均回收率分別為101.57％、9

7、8.20%，RSD分別為2.1%、2.2%(n=6)。
　?。?）本文建立的正相色譜法用于測定復方扶芳藤膠囊中衛(wèi)矛醇的含量，結果表明：衛(wèi)矛醇在2.91～29.1μg范圍內成良好線性關系，平均回收率為99.25%，RSD為2.6%(n=6)。
　　結論：本研究建立了復方扶芳藤膠囊指紋圖譜結合有效成分含量測定的質量控制方法。所建立的復方扶芳藤膠囊 HPLC指紋圖譜及主要有效成分人參皂苷Rb1、黃芪甲苷和衛(wèi)矛醇的含量測定方法具有較