凋亡大腸癌CT26細胞對小鼠免疫細胞的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察凋亡的大腸癌CT26細胞對在體外和體內,對小鼠免疫系統(tǒng)細胞(包括T淋巴細胞、NK細胞細胞和巨噬細胞)的增殖性及功能活性的影響,及對小鼠體內炎性相關因子表達是否存在相關性,并初步探討其可能的機制或者分子通路。
  方法:⑴將凋亡的小鼠大腸癌CT26細胞、壞死的小鼠大腸癌CT26細胞及正常的小鼠大腸癌CT26細胞分別與小鼠CTL、NK細胞和巨噬細胞共同培養(yǎng),用51Cr釋放實驗測定三種免疫細胞的活性;⑵將三種不同狀態(tài)的CT26

2、細胞(凋亡、壞死、對數(shù)生長期)通過靜脈輸注小鼠,分離血清得NK細胞、CD8+T淋巴細胞和巨噬細胞,用CCK-8檢測細胞增殖;⑶三色標記技術(抗CD4-FITC、CD25-PE、抗Foxp3-CY)檢測Treg在不同處理組的表達狀況;用ELISA檢測各組CT26細胞的sFas表達水平以及不同處理組小鼠血清IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-10、TGF-β的含量。
  結果:51Cr釋放實驗結果表示與凋亡大腸癌CT26細胞培養(yǎng)的

3、CTL、NK細胞和巨噬細胞的活性受到抑制(p<0.001);CCK-8方法檢測結果顯示凋亡大腸癌CT26細胞能夠抑制小鼠的NK細胞、CD8+T淋巴細胞和巨噬細胞增殖(p<0.001),凋亡細胞組的Treg的表達均較對數(shù)生長期細胞組、壞死細胞組明顯減弱(p<0.001);ELISA檢測表示凋亡CT26細胞的sFas較其他組過表達(p<0.05),抗炎癥因子如 IL-4、IL-10、TGF-β水平均高于正常腫瘤細胞組與壞死腫瘤細胞組,促炎因

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