抗腫瘤替尼類新藥NCE1505大鼠物質(zhì)平衡與體內(nèi)代謝研究.pdf

1、腫瘤是全球高發(fā)病率和高致死率的主要病因，尋找開(kāi)發(fā)安全有效的抗腫瘤藥物已成為無(wú)數(shù)醫(yī)藥科研工作者的責(zé)任和使命。NCE1505是以色瑞替尼進(jìn)行結(jié)構(gòu)改進(jìn)得到的一個(gè)全新結(jié)構(gòu)的酪氨酸激酶抑制劑，藥效學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其具有顯著的抗腫瘤活性，正在擬作為抗腫瘤1類新藥研究。
　　本文對(duì)抗腫瘤替尼類新藥 NCE1505進(jìn)行初步臨床前藥代動(dòng)力學(xué)、物質(zhì)平衡及大鼠體內(nèi)代謝研究。建立LC-MS/MS方法定量分析大鼠口服灌胃和靜脈注射給藥后大鼠血漿中的藥物濃度，獲得

2、重要的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)如生物利用度、半衰期、清除率、表觀分布容積等；通過(guò)尿、糞、膽汁排泄實(shí)驗(yàn)考察口服灌胃給藥后 NCE1505在大鼠體內(nèi)的物質(zhì)平衡；采用UPLC-Q-TOF-MS方法推測(cè)大鼠體內(nèi)可能的代謝產(chǎn)物。具體的研究方法、內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1)建立了定量檢測(cè)在大鼠血漿、尿、糞、膽汁中NCE1505濃度的LC-MS/MS方法。該方法專屬性好、靈敏度高（0.1 ng/mL）。生物樣本采用甲醇蛋白沉淀法處理，色譜分析采用Water

3、s Atlantis T3柱（100 mm×4.6 mm，5μm），流動(dòng)相為甲醇-5 mM甲酸銨水溶液（含有0.1％甲酸和5%甲醇），梯度洗脫，流速為0.6 mL/min。通過(guò)電噴霧離子化質(zhì)譜的正離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行檢測(cè)，待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)的定量離子對(duì)分別為m/z604.2?128.1和m/z357.0?134.0。在0.1~200 ng/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9981），批內(nèi)、批間精密度（以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示）均小于15%，準(zhǔn)

4、確度（以相對(duì)誤差表示）在±15%以內(nèi)。與同等劑量下靜脈注射給藥的AUC比較，大鼠口服灌胃給藥NCE1505的絕對(duì)生物利用度為43.7%。
　　2)應(yīng)用所建立的LC-MS/MS方法，對(duì)NCE1505進(jìn)行物質(zhì)平衡研究。大鼠口服灌胃給藥NCE1505（10 mg/kg）后，48.1%的NCE1505以原形排出體外，其中尿、糞、膽汁中的 NCE1505累積排泄分?jǐn)?shù)分別為0.145%、48.0%和15.2%。綜合絕對(duì)生物利用度結(jié)果，表明吸收

5、進(jìn)入體內(nèi)的NCE1505大部分通過(guò)生物轉(zhuǎn)化，以代謝物的形式排出體外。
　　3)應(yīng)用UPLC-Q-TOF-MS方法研究了NCE1505在大鼠體內(nèi)的代謝。研究發(fā)現(xiàn)大鼠口服灌胃給藥NCE1505后，體內(nèi)發(fā)生了廣泛的代謝。其中在尿液中檢測(cè)到30個(gè)代謝產(chǎn)物，其中I相代謝產(chǎn)物26個(gè)，?I相代謝產(chǎn)物4個(gè)；在糞便中檢測(cè)到32個(gè)代謝產(chǎn)物，其中I相代謝產(chǎn)物27個(gè)，II相代謝產(chǎn)物5個(gè)；在膽汁中檢測(cè)到34個(gè)代謝產(chǎn)物，其中I相代謝產(chǎn)物29個(gè)，II相代謝產(chǎn)物

6、5個(gè)。3種排泄途徑共推出33個(gè)I相代謝產(chǎn)物和8個(gè)II相代謝產(chǎn)物。I相代謝途徑包括單氧化、脫烷基、雙氧化、脫氫、加氫、氧化脫氯、還原脫氯、甲基化以及不同代謝途徑間的相互組合， II相代謝途徑包括葡糖醛酸化、乙?；土蛩峄?。
　　4)綜上，本文應(yīng)用液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，進(jìn)行了抗腫瘤替尼類新藥NCE1505在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)及代謝方面的研究。其創(chuàng)新點(diǎn)在于：1、建立了生物樣品中定量檢測(cè) NCE1505的 LC-MS/MS分析方法，并