胎膜早破孕婦胎膜組織不同區(qū)域PGRMC1、MMP-9的表達及意義.pdf

1、胎膜早破（PROM）是指：臨產(chǎn)前發(fā)生胎膜破裂，發(fā)生率國內2.7％~7%，國外報道5%~15%，分為未足月胎膜早破（pPROM<37W）和足月胎膜早破（tPROM≧37W）。未足月胎膜早破是指在妊娠20周以后，未滿37周胎膜在臨產(chǎn)前發(fā)生的胎膜破裂，發(fā)生率為2.0%~3.5%；足月胎膜早破是指妊娠滿37周后的胎膜破裂，發(fā)生率約為10%。胎膜早破可引起胎盤早剝、臍帶脫垂、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血、羊水減少、羊水栓塞、胎兒窘迫、宮內感染，尤其是未足月胎膜

2、早破易導致新生兒肺透明膜病、新生兒肺炎、敗血癥等，明顯地增加了圍產(chǎn)期母嬰發(fā)病率及病死率，是圍產(chǎn)期嚴重的并發(fā)癥之一。盡管胎膜破裂的機制仍然不清，但國內外學者普遍認為胎膜破裂依賴于機械拉伸、細胞外基質組成成份的不平衡及凋亡的增加，其中細胞凋亡和細胞外基質降解是其主要特征，因此對于進一步探索胎膜早破的發(fā)病機制至關重要。
　　有文獻報道孕酮受體膜組件1（PGRMC1）可以調控MMP-9的表達和凋亡的發(fā)生。雖然關于胎膜早破的研究眾多，但大多

3、學者也僅限于隨意取材、單區(qū)域取材，對胎膜組織不同區(qū)域分別取材并進行研究的文獻少之又少。但有研究發(fā)現(xiàn)胎膜局部微環(huán)境的改變能夠影響膠原纖維的降解及彈力纖維的產(chǎn)生，病理學研究揭示胎膜早破胎膜破裂區(qū)厚度下降35%；也有學者發(fā)現(xiàn)某些因子在胎膜破裂區(qū)[RS]與遠離破膜區(qū)[DS]的表達是不一致的；王麗等也發(fā)現(xiàn)某些因子在孕婦外周血，臍血，羊水，胎膜組織中的表達并不是完全一致的。基于以上觀點，推測胎膜早破可能是先由局部微環(huán)境的改變及局部一些細胞因子表達的

4、改變，進而導致此區(qū)域胎膜組分及厚度的改變，最后導致此區(qū)胎膜破裂的一個過程。因此本研究欲通過探索不同孕婦組不同區(qū)域胎膜組織中 MMP-9和PGRMC1的表達情況，進而明確 MMP-9和PGRMC1的表達與胎膜早破發(fā)生的關系。
　　目的:通過探索孕婦胎膜組織不同區(qū)域（胎膜破裂區(qū)[RS]及遠離破膜區(qū)[DS]）中PGRMC1和MMP-9的表達差異，進而明確PGRMC1和MMP-9的表達與胎膜早破發(fā)生的關系及其在胎膜早破中的可能的發(fā)病機制。

5、
　　資料與方法:
　　1.研究對象：選擇2014年7月至2014年11月在鄭州大學第三附屬醫(yī)院產(chǎn)科住院分娩的單胎孕婦80例，分兩組：
　?。?）胎膜早破組：40例單胎胎膜早破孕婦（PROM），孕周均為24-40周，其中8例為剖宮產(chǎn)，31例為陰道分娩（產(chǎn)程最長不超過14.5小時）。所有足月胎膜早破孕婦均于破膜后3天內結束分娩，未足月胎膜早破孕婦最長于破膜后2周內結束分娩。所有孕婦均無任何臨床感染癥狀（體溫小于38℃），

6、排除因羊水過多、機械性刺激引起的胎膜早破、雙胎、宮頸內口松弛、妊娠合并子宮畸形、妊娠合并子宮肌瘤等妊娠期并發(fā)癥。
　?。?）對照組：40例單胎胎膜完整擇期剖宮產(chǎn)孕婦（其中部分為無宮縮因前置胎盤剖宮產(chǎn)孕婦，部分為因頭盆不稱、臀位剖宮產(chǎn)孕婦）作為對照組，孕周24-40周，對照組術前均未進入產(chǎn)程，且排除羊水過多及宮頸發(fā)育不全。
　　2.研究方法
　　(1)組織的收集與保存：分娩后20分鐘內收集每位孕婦的破裂區(qū)胎膜[RS]及遠

7、離破裂區(qū)的胎膜[DS]組織各2份。于胎膜破裂處取約長2cm×寬2cm的胎膜組織作為破裂區(qū)胎膜；于胎盤邊緣取約長2cm×寬2cm的胎膜組織作為遠離破裂區(qū)的胎膜。
　　(2)采用免疫組織化學方法對胎膜組織不同區(qū)域中PGRMC1和MMP-9的表達進行定位及半定量。
　　(3)采用Real-time PCR法、Western blot方法檢測以上兩組胎膜破裂區(qū)[RS]，遠離破膜區(qū)[DS]中PGRMC1和MMP-9的mRNA及蛋白的表

8、達水平。
　　(4)采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件對所有實驗結果進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料用Fisher確切概率法；計量資料用均數(shù)±標準差表示，兩組獨立樣本的t檢驗用于組間比較，以a=0.05為檢驗水準。
　　結果:
　　1.兩組孕婦一般臨床資料的比較：兩組孕婦的年齡、孕周、體重指數(shù)均無統(tǒng)計學意義。
　　2.免疫組織化學染色結果示
　　(1) PGRMC1主要在絨毛膜層和蛻膜層表達，且主要于細胞核及部分細胞質中

9、表達；四個區(qū)域的胎膜組織中，PGRMC1在胎膜早破組的胎膜破裂區(qū)著色最淺，且有統(tǒng)計學意義；
　　(2) MMP-9主要在絨毛膜層和蛻膜層表達，且主要于細胞質及部分細胞核中表達；四個區(qū)域的胎膜組織中，MMP-9在胎膜早破組的胎膜破裂區(qū)著色最深，且有統(tǒng)計學意義；
　　3. PGRMC1蛋白在兩組間不同區(qū)域中的表達水平的比較
　　(1)與胎膜早破組的遠離破膜區(qū)（1.045±0.098）相比，PGRMC1在胎膜早破組的胎膜破裂

10、區(qū)中（0.607±0.069）表達水平低，差異有統(tǒng)計學意義；PGRMC1在對照組的胎膜破裂區(qū)（1.053±0.094）及遠離破膜區(qū)（1.041±0.094）的表達差異是無統(tǒng)計學意義的；
　　(2)與對照組的胎膜破裂區(qū)（1.053±0.094）相比，PGRMC1在胎膜早破組的胎膜破裂區(qū)（0.607±0.069）的表達較低，差異有統(tǒng)計學意義；兩組間的遠離破膜區(qū)相比，PGRMC1在胎膜早破組（1.045±0.098）及對照組（1.041

11、±0.094）的遠離破膜區(qū)表達差異無統(tǒng)計學意義；
　　4. MMP-9蛋白在兩組間四個不同區(qū)域中的表達水平的比較
　　(1)與胎膜早破組的遠離破膜區(qū)（1.009±0.064）相比，MMP-9在胎膜早破組的胎膜破裂區(qū)中（1.450±0.122）表達水平較高，差異有統(tǒng)計學意義；MMP-9在對照組的胎膜破裂區(qū)（1.041±0.076）及遠離破膜區(qū)（1.011±0.074）的表達差異是無統(tǒng)計學意義；
　　(2)與對照組的胎膜破

12、裂區(qū)（1.041±0.076）相比，MMP-9在胎膜早破組的胎膜破裂區(qū)（1.450±0.122）的表達較高，差異有統(tǒng)計學意義；兩組間的遠離破膜區(qū)相比，MMP-9在胎膜早破組（1.009±0.064）及對照組（1.011±0.074）的遠離破膜區(qū)表達差異無統(tǒng)計學意義；
　　5. PGRMC1在兩組間不同區(qū)域中的mRNA表達水平的比較
　　(1)與胎膜早破組的遠離破膜區(qū)（0.903±0.004）相比，PGRMC1在胎膜早破組的胎

13、膜破裂區(qū)中（0.635±0.020）表達水平低，差異有統(tǒng)計學意義；PGRMC1在對照組的胎膜破裂區(qū)（0.926±0.020）及遠離破膜區(qū)（0.962±0.030）的表達差異是無統(tǒng)計學意義；
　　(2)與對照組的胎膜破裂區(qū)（0.926±0.020）相比，PGRMC1在胎膜早破組的胎膜破裂區(qū)（0.635±0.020）的表達較低，差異有統(tǒng)計學意義；兩組間的遠離破膜區(qū)相比，PGRMC1在胎膜早破組（0.903±0.004）及對照組（0.9

14、62±0.030）的遠離破膜區(qū)表達差異無統(tǒng)計學意義；
　　6. MMP-9在兩組間四個不同區(qū)域中的mRNA表達水平的比較
　　(1)與胎膜早破組的遠離破膜區(qū)（0.919±0.011）相比，MMP-9在胎膜早破組的胎膜破裂區(qū)中（1.809±0.046）表達水平較高，差異有統(tǒng)計學意義；MMP-9在對照組的胎膜破裂區(qū)（1.003±0.021）及遠離破膜區(qū)（0.952±0.013）的表達差異是無統(tǒng)計學意義的；
　　(2)與對照