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文檔簡介
1、糖尿病屬于一種慢性代謝性疾病,已成為世界死亡率排名第四的疾病。糖尿病對患者健康最大的威脅源于其嚴(yán)重的并發(fā)癥,如傷口難愈合、糖尿病性腎臟疾病、視網(wǎng)膜病變、周圍神經(jīng)病變等。難愈性創(chuàng)面常伴隨傷口反復(fù)感染,導(dǎo)致局部組織缺血壞死,缺乏有效治療手段,因此成為目前研究熱點(diǎn)。黃芪甲苷(AS-IV)作為黃芪主要的有效成分,研究顯示在抗炎和免疫調(diào)節(jié)方面發(fā)揮重要作用。本課題擬建立糖尿病小鼠難愈傷口模型,研究AS-IV在促進(jìn)皮膚傷口組織愈合中的作用,并探討其相
2、關(guān)的作用機(jī)制,為臨床上難愈性傷口組織治療提供新的思路。
研究目的:
觀察AS-IV在糖尿病小鼠難愈傷口模型中的作用,研究AS-IV促傷口組織修復(fù)的免疫調(diào)節(jié)機(jī)理;體外研究AS-IV對小鼠成纖維細(xì)胞(NIH3T3)增殖和趨化等生物學(xué)功能的影響,初步探討AS-IV促進(jìn)糖尿病小鼠難愈傷口組織修復(fù)的機(jī)制。
研究方法:
建立糖尿病小鼠難愈傷口模型,傷口組織局部給予AS-IV處理,在不同時間點(diǎn)觀察傷口愈合面積和
3、愈合率的變化,觀察AS-IV的作用效果;組織病理學(xué)檢測傷口組織局部ECM的形成、新生血管和肉芽組織的生成;體外檢測AS-IV對NIH3T3細(xì)胞增殖和趨化的影響,探討AS-IV對巨噬細(xì)胞極化的調(diào)節(jié)作用。
研究結(jié)果:
1. AS-IV促進(jìn)糖尿病小鼠難愈性傷口的修復(fù)
建立糖尿病小鼠難愈性傷口模型,給予AS-IV處理后,小鼠傷口愈合時間明顯縮短為13天。組織病理學(xué)顯示傷口肉芽組織、新生血管和ECM的形成速度明顯高于
4、對照組,免疫熒光顯示傷口局部組織中M2型巨噬細(xì)胞水平升高。
2. AS-IV對NIH3T3生物學(xué)活性的影響
AS-IV處理NIH3T3細(xì)胞后,明顯上調(diào)NIH3T3細(xì)胞的趨化、增殖和分泌功能。
3. AS-IV對巨噬細(xì)胞極化的影響
AS-IV單獨(dú)處理未能影響M1/M2型巨噬細(xì)胞極化,但與IL-13協(xié)同時能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化,同時上調(diào)M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)分子如CD206的表達(dá)。
4. A
5、S-IV調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化對NIH3T3細(xì)胞功能活性的影響
AS-IV協(xié)同IL-13培養(yǎng)巨噬細(xì)胞后,其上清液明顯增強(qiáng)NIH3T3細(xì)胞的趨化、增殖和分泌功能,其效應(yīng)優(yōu)于AS-IV單獨(dú)作用。AS-IV協(xié)同IL-13促進(jìn)M2型巨噬細(xì)胞高表達(dá)TGF-β,隨后TGF-β信號通路對NIH3T3細(xì)胞功能活性產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用。
結(jié)論:
AS-IV通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞向M2型極化,影響成纖維細(xì)胞的趨化、增殖和分泌等生物學(xué)功能,進(jìn)而促進(jìn)
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