組織因子促進(jìn)糖尿病鼠傷口愈合及對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子的誘導(dǎo)作用.pdf

1、組織因子(TF,Tissue Factor)是一個(gè)分子量為47kDa的單鏈跨膜糖蛋白,由295個(gè)氨基酸殘基組成,包括219個(gè)氨基酸殘基組成的胞外區(qū),23個(gè)氨基酸殘基組成的跨膜區(qū)和由21個(gè)氨基酸殘基組成的短的胞漿尾.TF是凝血因子FVIIa的受體,FVIIa與TF胞外區(qū)結(jié)合后,啟動(dòng)體內(nèi)外源性的凝血途徑,在生理性止血中有重要意義.正常生理狀況下,血管內(nèi)皮細(xì)胞和血細(xì)胞不表達(dá)TF,但在病理情況下,一些因子刺激這兩種細(xì)胞開始表達(dá)TF,引起一些病理

2、性的凝血反應(yīng),例如,彌散性血管內(nèi)凝血、血栓和敗血性休克發(fā)生等.為了證實(shí)在糖尿病皮膚傷口修復(fù),血管發(fā)生過程中TF起重要作用,我們用克隆有TF的真核表達(dá)載體進(jìn)行傷口局部基因轉(zhuǎn)染.發(fā)現(xiàn)TF轉(zhuǎn)染改善了糖尿病情況下傷口血管生成的不足,促進(jìn)了傷口處血管發(fā)生,提高了血流供應(yīng),角質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞的增殖遷移,膠元合成,顆粒組織形成等,明顯加快了傷口愈合速度.TF促進(jìn)傷口愈合的可能機(jī)制包括三個(gè)方面.一是促進(jìn)了VEGF,α-SMA的表達(dá),二是促進(jìn)角質(zhì)細(xì)胞表

3、達(dá)與傷口愈合有關(guān)的基因,三是TF本身就具有促新血管發(fā)生的作用.VEGF是血管內(nèi)皮細(xì)胞特有的有絲分裂原,具有很強(qiáng)的促血管生成作用.TF胞外區(qū)與凝血因子FVIa的結(jié)合,而不是胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域,在誘導(dǎo)VEGF表達(dá)中起重要作用.雖然目前TF在腫瘤血管發(fā)生中的重要作用已經(jīng)肯定,但其機(jī)制仍了解很少.基于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果--TF誘導(dǎo)VEGF的表達(dá),我們又用黑色素瘤細(xì)胞HT144探討性的研究了TF誘導(dǎo)VEGF表達(dá)的結(jié)構(gòu)功能關(guān)系,信號(hào)傳導(dǎo)途徑,和相應(yīng)的VEGF啟動(dòng)

4、子區(qū).發(fā)現(xiàn)在腫瘤細(xì)胞中,TF誘導(dǎo)VEGF的表達(dá),與TF的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域有關(guān),確切的說與凝血因子FVIIa的結(jié)合有關(guān).與TF胞內(nèi)區(qū),即胞內(nèi)區(qū)潛在的磷酸化位點(diǎn)無關(guān).對(duì)TF誘導(dǎo)VEGF信號(hào)通路的研究結(jié)果表明,TF的表達(dá)促進(jìn)了MAPK1/2的磷酸化,證實(shí)MEK1/2、MAPK1/2在此誘導(dǎo)關(guān)系中有重要的作用.蛋白激酶A,蛋白激酶C,蛋白酪氨酸激酶,3-磷酸肌醇激酶等與此誘導(dǎo)作用無關(guān).TF在轉(zhuǎn)錄表達(dá)和轉(zhuǎn)錄后增加mRNA穩(wěn)定性兩個(gè)水平上同時(shí)調(diào)控VEG