血管內(nèi)皮生長因子促進(jìn)骨折愈合的實驗研究.pdf

1、目的：制作脛骨骨折克氏鋼針內(nèi)固定術(shù)后的動物模型，實驗組動物腹腔注射小鼠VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)，對照組動物僅作骨折模型，于術(shù)后不同時段取脛骨進(jìn)行X線攝片；并于術(shù)后不同時段切取骨折斷端，進(jìn)行組織學(xué)觀察，以及統(tǒng)計學(xué)分析，對比研究VEGF對動物骨折愈合的作用，探討應(yīng)用VEGF對骨折愈合所產(chǎn)生的影響。 方法：42只健康雄性小白鼠，隨機(jī)分2組，每組21只。右側(cè)下肢膝關(guān)節(jié)處縱向剪開皮膚，在脛骨髁間處0.7毫米注射器針頭鉆孔，沿髓腔方向插

2、入直徑約為0.35毫米、長度約為1.2cm的無菌克氏鋼針，在脛骨中上1/3處鈍性剝離肌肉筋膜，橫向折斷脛骨，縫合切口。實驗組(VEGF組)腹腔注射小鼠VEGF，每次5ng，每天兩次，共兩周；對照組僅作骨折模型，不作任何處理。骨折后分別于手術(shù)后1、2、3周3個時相點每組分批各處死7只動物，取出右脛骨后兩組動物分別進(jìn)行X線攝片，動態(tài)對比觀察骨痂的生長和骨折的愈合情況：手術(shù)取出克氏鋼針后，右脛骨矢狀軸方向系列切片HE染色組織學(xué)觀察新生毛細(xì)血管

3、、骨小梁、軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨痂等細(xì)胞組織學(xué)形態(tài)變化以及根據(jù)斷端軟骨細(xì)胞骨化率進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，對比研究兩組動物的骨折愈合情況。 結(jié)果：1、X線觀察，實驗組動物3周時骨折端均有明顯骨性骨痂，局部增粗，骨密度較高，骨折線消失，骨折愈合。對照組動物3周時有1只骨折端有連續(xù)性骨痂通過，5只有骨痂通過，但骨折線仍可見，有1只無骨痂生長。2、組織學(xué)觀察，實驗組動物3周時，骨折處內(nèi)外骨痂改建、塑建進(jìn)一步完善，破骨細(xì)胞活躍，骨小梁形成骨性骨痂

4、連接斷端并骨髓腔形成，骨折線消失，骨折被修復(fù)。對照組動物3周時，骨折處有1只可見纖維性骨痂中骨小梁形成骨性骨痂連接，4只可見骨痂出現(xiàn)，但骨折線清晰，2只斷端無愈合現(xiàn)象。3、統(tǒng)計學(xué)分析，兩組動物在術(shù)后第一周，斷端軟骨細(xì)胞骨化率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，在術(shù)后第二、三周，骨折斷端軟骨細(xì)胞骨化率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論：本實驗證明了小鼠VEGF能通過促進(jìn)小鼠脛骨骨折端及周圍軟組織血管的生成、增加骨折端血流量，促

5、進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞活性，并參與軟骨的成熟和吸收，促進(jìn)軟骨內(nèi)成骨與成骨細(xì)胞相互作用，誘導(dǎo)骨形成，促進(jìn)骨愈合。 意義：VEGF在骨骼修復(fù)中起著十分重要的作用已得到廣泛共識。雖然各國學(xué)者對VEGF應(yīng)用于骨折治療進(jìn)行了大量研究，并不斷取得突破性進(jìn)展，但VEGF安全有效地應(yīng)用于臨床還需要進(jìn)一步研究。隨著對VEGF研究及骨折愈合機(jī)制認(rèn)識的深人，分子生物學(xué)及基因技術(shù)的完善與發(fā)展，骨科領(lǐng)域諸如骨折、骨缺損、異體骨移植修復(fù)過程的爬行替