血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子對(duì)心肺發(fā)育影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子對(duì)肺表面活性物質(zhì)磷脂合成的影響 目的：研究血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactorVEGF)對(duì)肺表面活性物質(zhì)合成、分泌的影響，探討防治早產(chǎn)兒呼吸窘迫綜合征(RDS)的新途徑。方法：孕19天Wistar大鼠剖腹取胎鼠，原代培養(yǎng)肺泡Ⅱ型細(xì)胞，分成VEGF組、地塞米松組、VEGF加地塞米松組和對(duì)照組進(jìn)行試驗(yàn)，測(cè)定肺表面活性物質(zhì)總磷脂、磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰甘油(PG)

2、、鞘磷脂(SM)含量。結(jié)果：VEGF組、地塞米松組與VEGF加地塞米松聯(lián)合應(yīng)用組總磷脂含量較對(duì)照組均顯著增加，聯(lián)合應(yīng)用組總磷脂增加最明顯。VEGF組、地塞米松組和聯(lián)合應(yīng)用組均能使PC、SM增高，VEGF對(duì)PC、SM作用更明顯。VEGF和聯(lián)合應(yīng)用組尚可增加PG含量，而地塞米松對(duì)PG的合成無(wú)明顯作用。結(jié)論：VEGF比地塞米松能更有效地刺激早產(chǎn)鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞合成和分泌肺表面活性物質(zhì)磷脂，它與地塞米松具有協(xié)同作用，可使肺表面活性物質(zhì)磷脂進(jìn)一步增

3、加。VEGF可能通過(guò)促進(jìn)肺泡Ⅱ型細(xì)胞的發(fā)育，增加肺表面活性物質(zhì)磷脂的合成，從而改善早產(chǎn)兒肺功能，防止早產(chǎn)兒RDS的發(fā)生。 第二部分血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子對(duì)肺泡Ⅱ型細(xì)胞相關(guān)受體的影響 目的：研究血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)對(duì)肺泡表面活性物質(zhì)結(jié)合蛋白B(SP-BsurfactantproteinB)、肺泡Ⅱ型細(xì)胞VEGF及其受體Flt-1、Flk-1表達(dá)的影響，探討其聯(lián)合使用地塞米松的作用。方法：孕19天Wistar大鼠剖腹取胎鼠

4、，原代培養(yǎng)肺泡Ⅱ型細(xì)胞，分成VEGF組、地塞米松組、VEGF加地塞米松組和對(duì)照組進(jìn)行試驗(yàn)，測(cè)定肺泡Ⅱ型細(xì)胞VEGF及其受體Flt-1、Flk-1和SP-B表達(dá)。結(jié)果：VEGF組、地塞米松組與VEGF加地塞米松組SP-B陽(yáng)性表達(dá)，對(duì)照組陰性表達(dá)；VEGF組與VEGF加地塞米松組VEGF、Flt-1、Flk-1陽(yáng)性表達(dá)，地塞米松組VEGF、Flt-1、Flk-1陰性表達(dá)。結(jié)論：VEGF能促進(jìn)肺泡發(fā)育和肺表面活性物質(zhì)結(jié)合蛋白B的合成、分泌，拮

5、抗地塞米松下調(diào)肺泡Ⅱ型細(xì)胞受體的表達(dá)。但是否能減輕孕婦使用地塞米松引起的胎兒肺與體重的比值下降，次級(jí)肺泡隔形成減少等副作用，尚待進(jìn)一步研究。 第三部分：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與地塞米松對(duì)早產(chǎn)鼠肺發(fā)育影響的實(shí)驗(yàn)研究 目的：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)以及地塞米松單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用對(duì)早產(chǎn)大鼠肺表面活性物質(zhì)、肺泡表面活性物質(zhì)結(jié)合蛋白BmRNA(SP-BmRNA)表達(dá)的影響，探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)以及地塞米松單獨(dú)或聯(lián)

6、合應(yīng)用與肺發(fā)育的關(guān)系，為臨床防治早產(chǎn)兒呼吸窘迫綜合征(RDS)提供新途徑。方法：孕15d清潔級(jí)Wistar大鼠12只，隨機(jī)分為4組，每組平均3只，試驗(yàn)分組：VEGF-165組、地塞米松組、VEGF加地塞米松組和對(duì)照組進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)用薄層層析法測(cè)定肺組織中肺泡表面活性物質(zhì)總磷脂、磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰甘油(PG)、鞘磷脂(SM)含量。同時(shí)應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)早產(chǎn)鼠肺組織中肺泡表面活性物質(zhì)結(jié)合蛋白B(SP-BmRNA)的表達(dá)。結(jié)果：VEG

7、F-165組、地塞米松組與VEGF加地塞米松聯(lián)合應(yīng)用組肺組織中總磷脂含量增加，其中聯(lián)合應(yīng)用組總磷脂含量最高。VEGF組與對(duì)照組比較PC、PG含量有顯著性差異，SM含量無(wú)顯著性差異。地塞米松組與對(duì)照組比較PC、SM含量有顯著性差異，PG含量無(wú)顯著性差異。地塞米松組與VEGF加地塞米松組肺組織中SP-BmRNA表達(dá)與對(duì)照組比較，p＜0.05，差異有顯著性，VEGF組與對(duì)照組比較，p＞0.05，差異無(wú)顯著性。結(jié)論：VEGF-165能促進(jìn)肺表面

8、活性物質(zhì)的合成和分泌，VEGF、地塞米松對(duì)肺泡磷脂各成分及蛋白的影響各不相同，兩者具有協(xié)同作用。它們可能通過(guò)不同的機(jī)制，增加了肺泡表面活性物質(zhì)的合成和分泌，同時(shí)在分子水平上促進(jìn)肺表面活性蛋白的分泌與合成，改善了肺功能，有利于防止因肺表面活性物質(zhì)缺乏所致的早產(chǎn)兒RDS的發(fā)生。 第四部分血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與維生素A對(duì)胎兔動(dòng)脈導(dǎo)管和肺發(fā)育的影響 目的：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)與維生素A(VitA)對(duì)胎兔動(dòng)脈導(dǎo)管和肺發(fā)育的影響

9、，為防治早產(chǎn)兒動(dòng)脈導(dǎo)管未閉尋找新的途徑。方法：8只孕兔隨機(jī)分為4組，VEGF組、VitA組、生理鹽水對(duì)照組，每組各2只：分別在受孕第25天給予VEGF0.1μg/kg，第25和26兩天連續(xù)運(yùn)用3000IU/kgVitA，第25和26兩天連續(xù)運(yùn)用生理鹽水1ml/kg。于孕第27天內(nèi)(早產(chǎn)期內(nèi))解剖孕兔，取胎兔的肺組織、動(dòng)脈導(dǎo)管和及肝兔的羊水。羊水做羊水板層小體測(cè)定，肺組織固定后HE染色了解肺的發(fā)育情況，部分動(dòng)脈導(dǎo)管固定后HE染色了解內(nèi)膜增