血管內(nèi)皮生長因子受體KDR的導(dǎo)向制劑的研究.pdf

1、該課題以特異高表達(dá)于新生血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的血管內(nèi)皮生長因子受體Ⅱ（KDR）為靶,篩選隨機噬菌體環(huán)7肽庫和12肽庫,通過競爭性洗脫,從第二輪篩選的結(jié)果中,隨機挑取40個噬菌體克隆,進(jìn)行ELISA、細(xì)胞ELISA、競爭結(jié)合實驗和雞胚絨毛尿囊膜試驗（CAM assay）,發(fā)現(xiàn)有6個噬菌體克隆具有特異結(jié)合靶分子KDR的活性,其中P3、P13克隆具有抑制雞胚絨毛尿囊膜新生血管形成的活性.小肽序列同源性分析,這六條小肽序列彼此之間沒有同源性模式,與

2、VEGF序列進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)P3、P13、P5和P25小肽序列與VEGF有一定的同源性,其中P3和P13序列與VEGF的結(jié)合位點有一定同源性.具有抑制新生血管形成活性的小肽P3、P13,可用于研究VEGF/KDR的相互作用機理,以及設(shè)計小分子VEGF165的拮抗劑.P5是6種陽性噬菌體中結(jié)合活性最強的噬菌體克隆,可作為KDR靶向制劑的導(dǎo)向彈頭使用.為了檢測在體外P5分子是否能將與其偶聯(lián)的物質(zhì)帶到靶向部位,依據(jù)測序結(jié)果化學(xué)合成小肽P5.EL