微生物來源的人血管內(nèi)皮生長因子受體-2酪氨酸激酶(KDR-CD)抑制研究.pdf

1、血管增生(即從已有的血管和內(nèi)皮細胞形成新的血管)對于許多疾病如炎癥、癌癥、創(chuàng)傷愈合、心血管疾病、牛皮癬、消化性潰瘍、類風濕性關節(jié)炎、動脈粥樣硬化和黃斑退行性疾病等是非常重要的；在腫瘤中,腫瘤誘導因子促進血管細胞分化、轉移,直到形成新的血管,從而造成血管增生。Virchew等人早在1863年就確認了腫瘤中毛細血管網(wǎng)的存在,并認為它是由宿主的血管分化而來。后來JudahFolkman在1971年提出把腫瘤賴以生存的血管生長通路作為靶點能有效

2、治療癌癥。隨著幾個涉及血管發(fā)生的特異性分子為靶點的藥物(bevacizumab、Sunitinib和sorafenib等)的出現(xiàn),驗證了Folkman的推測:即用針對血管部分的特異性血管發(fā)生抑制劑能有效抑制腫瘤的生長。
　　 血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)作為血管內(nèi)皮細胞特異的有絲分裂原,直接參與了血管形成的過程,促進內(nèi)皮細胞分裂增殖,促使新生血管形成,同時還有

3、效地提高血管的通透性。VEGF作為一個有效的多功能細胞因子,它是高度保守的糖蛋白,對內(nèi)皮血管有重要的作用,是誘導腫瘤新血管形成的一個關鍵因子；它還能幫助維持不成熟的血管系統(tǒng)的活性,并誘導增加細胞存活的抗凋亡蛋白-Bcl-2和A1的表達；此外,VEGF蛋白也能調(diào)控造血干細胞的存活并和KDR結合,該結合體產(chǎn)生一個有效的內(nèi)皮細胞應答,直接作用于內(nèi)皮細胞,從而誘導血管形成。而且VEGF是一個很強的促細胞分裂素,促使動脈、靜脈和淋巴管的血管內(nèi)皮細

4、胞增生。研究人員已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在許多腫瘤中,VEGF的表達明顯升高,并證明VEGF的過度表達同腫瘤轉移風險的增加和不同癌癥中的所有預后不良密切相關。
　　 VEGF的功能是通過其特異性受體來發(fā)揮作用的。VEGFs受體家族有三個成員,分別為VEGFR1(Flt-1)、VEGFR2(KDR/Flk—1)和VEGFR3(Flt-4),它們都屬于受體酪氨酸(RTK)Ⅲ型超家族。研究表明VEGFR2(KDR/Flk-1)在調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞增殖及分化

5、反應中最為重要,是內(nèi)皮細胞VEGF信號傳導的主要執(zhí)行者,VEGF與KDR結合使受體二聚體化,進一步激發(fā)KDR酪氨酸發(fā)生磷酸化,導致自身酶活性和下游信號相關酶類的激活,從而調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞相關反應。新生血管的形成對惡性腫瘤的生長是必不可少的因素,因而以KDR為靶點進行藥物設計和篩選是開發(fā)抗腫瘤藥物的一個重要方法。
　　 采用本所生物工程研究室以KDR—CD蛋白為靶位,建立的KDR酪氨酸激酶的抑制劑篩選模型,我們分別對鏈霉菌I06A

6、-02754、I06A-02832和I06A-03304的代謝產(chǎn)物進行了研究。綜合應用多種色譜方法,從三株鏈霉菌的發(fā)酵液中得到了十個化合物,分別命名為2754A、2754B、2754C、2754R、2832A、2832B、2832C、3304A、3304B和3304C。經(jīng)紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜和核磁共振波譜等波譜方法的綜合解析,確定了它們的結構。2754B、2754C、2754R、2832A、2832B、2832C、3304A、330

7、4B和3304C分別為已知化合物nanaomycinαA、nanaomycinβA、juglomycinD、色氨酸、環(huán)(脯氨酸-酪氨酸)、環(huán)(苯丙氨酸-甘氨酸)、環(huán)(脯氨酸-亮氨酸)、環(huán)(4-羥脯氨酸-苯丙氨酸)和環(huán)(脯氨酸-苯丙氨酸)。2754A則被鑒定為一新化合物,活性測定發(fā)現(xiàn)2754A、2754B、2754C、2754R、2832A、2832B、2832C、3304A、3304B和3304C均有一定的KDR-CD抑制活性；并首次報