活血化痰配伍對高脂血癥合并鐵代謝異常小鼠的保護(hù)效應(yīng)研究.pdf

1、目的：
　　1.明確高脂飲食對Fpn1 Tek-cre小鼠鐵代謝的影響及其與內(nèi)皮損傷、氧化應(yīng)激及鐵調(diào)素相關(guān)性；
　　2.明確活血化痰配伍對高脂血癥合并鐵代謝異常小鼠的保護(hù)效應(yīng)及其分子機(jī)制。
　　方法：
　　1．將16只8周齡雄性fpn1 tek-cre小鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為2組，每組8只，其中8只喂養(yǎng)高脂飼料，做實(shí)驗(yàn)組（MOD，model group）；8只喂飼普通飼料，為正常對照組（NOR，norma

2、l group）。造模8周處死兩組小鼠。所有小鼠均取血、分離肝臟及主動(dòng)脈。全自動(dòng)生化分析儀檢測：TC、TG、LDL-C、HDL-C、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）；ELISA法測定血清鐵調(diào)素(hepcidin)、一氧化氮（NO）、內(nèi)皮素-1（ET-1）、白介素-6（IL-6）；
　　2．40只8周齡雄性Fpn1 Tek-cre小鼠予以高脂飼料喂養(yǎng)8周后，隨機(jī)分為模型組(MOD)、阿托伐他汀組（ATO，Atorvasta

3、tin group）、丹參組（SM，Salvia miltiorrhiza group）、瓜蔞組(TKM，Trichosanthes Kirilowii Maxim group)、丹參瓜蔞組（SM-TKM），每組8只。繼續(xù)高脂喂養(yǎng)，按人體重和動(dòng)物間體表面積折算的等效比值的臨床推薦劑量分別給予生理鹽水、阿托伐他汀混懸液5.1mg/kg、丹參組2.56g/kg、瓜蔞組3.84g/kg、丹參瓜蔞組6.4g/kg連續(xù)灌胃2周后處死，分離血清、肝

4、臟及主動(dòng)脈。全自動(dòng)生化分析儀檢測：TC、TG、LDL-C、HDL-C、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）；ELISA法測定血清鐵調(diào)素(hepcidin)、一氧化氮（NO）、內(nèi)皮素-1（ET-1）、白介素-6（IL-6）；免疫組織化學(xué)法觀察主動(dòng)脈組織內(nèi)骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP-6，bone morphogenetic protein-6）表達(dá)；Western blotting檢測主動(dòng)脈組織p-smad1/5/8、p-stat3蛋白表

5、達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　1.高脂飲食后，與NOR組比較，MOD小鼠血清中TG、TC、LDL及hepcidin水平均明顯增高（P<0.01），肝臟鐵細(xì)胞計(jì)數(shù)增多（P<0.05），出現(xiàn)明顯的鐵沉積；同時(shí)血清 ET-1、IL-6、MDA水平顯著升高（P<0.05），NO及 SOD水平顯著下降（P<0.05）；此外，MOD組內(nèi)皮BMP-6、p-stat3、p-smad1/5/8蛋白表達(dá)水平均顯著增加（P<0.05）。
　　2.

6、藥物干預(yù)后，與MOD組比較，各藥物組hepcidin顯著下降；肝臟內(nèi)鐵細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著減少（P<0.05），鐵沉積得到顯著緩解；同時(shí)，血清ET-1、IL-6、MDA水平顯著降低（P<0.05），NO及SOD水平明顯升高（P<0.05）；此外，各藥物組主動(dòng)脈內(nèi)皮BMP-6、p-stat3、p-smad1/5/8蛋白水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01）。各藥物組間比較，丹參瓜蔞組（活血化痰）效果要優(yōu)于丹參組（活血）及瓜蔞組（化痰）。