我國中華白蛉的鑒別和分子群體遺傳結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、中華白蛉(Phlebotomus chinensis Newstead，1843)隸屬毛蠓科(Psychodidae)、白蛉亞科(Phlebotominae)、白蛉屬(Phlebotomus)。中華白蛉在我國的分布廣泛，是其分布區(qū)利什曼病的重要傳播媒介。多年的研究證實(shí)中華白蛉在不同地理分布區(qū)，其形態(tài)特征、生態(tài)習(xí)性和傳病能力存在一定差異，具有相當(dāng)?shù)膹?fù)雜性，部分地區(qū)其分類地位存疑多年。有鑒于此，深入探討中華白蛉的分類地位和群體遺傳結(jié)構(gòu)具有重

2、要意義。
　　 本課題的研究策略如下：首先，在我國中華白蛉的分布地，廣泛收集樣本；然后，應(yīng)用形態(tài)特征與分子特征相結(jié)合的方法，對應(yīng)分類鑒別中華白蛉及其他蛉種，并探討中華白蛉的分類地位；其次，篩選中華白蛉具有多態(tài)性的微衛(wèi)星DNA位點(diǎn)，描述其基本特征；再者，應(yīng)用mtDNA-Cytb基因和多態(tài)微衛(wèi)星DNA位點(diǎn)兩個(gè)分子標(biāo)志，闡明我國中華白蛉不同群體間的基因交流、基因漸滲、遺傳差異程度以及群體分化等問題，并分析影響群體遺傳結(jié)構(gòu)的主要因素。取

3、得如下主要結(jié)果：
　　 1.本研究獲得我國河南、陜西、四川和甘肅4省6個(gè)地點(diǎn)的中華白蛉樣本，涵蓋不同的地理環(huán)境、生態(tài)習(xí)性、海拔高度和疾病流行區(qū)。采集獲得模式產(chǎn)地(四川九寨溝，海拔2000m以上)的四川白蛉，以及新疆的吳氏白蛉和長管白蛉。
　　 2.檢視了來自不同采集地中華白蛉132只、四川白蛉26只、吳氏白蛉29只，以及長管白蛉23只。吳氏白蛉和長管白蛉具有典型的形態(tài)鑒別特征，而中華白蛉與四川白蛉的差異主要體現(xiàn)在翅長，及

4、其雄蛉與雌蛉的翅長度比例。
　　 3.對應(yīng)形態(tài)鑒別確認(rèn)的中華白蛉、四川白蛉和吳氏白蛉，單蛉抽提基因組DNA，擴(kuò)增和測定rDNA-ITS2和mtDNA-Cytb序列。序列比對結(jié)果顯示，ITS2序列在中華白蛉、四川白蛉和吳氏白蛉種間缺乏解析度，Cytb序列的種間解析度比ITS2理想。中華白蛉與四川白蛉的分子特征已具有一定明顯差別，且中華白蛉種內(nèi)也出現(xiàn)遺傳分化。提示目前將四川白蛉暫列為獨(dú)立種較為合理，四川白蛉與中華白蛉的親緣關(guān)系非常近

5、，四川白蛉應(yīng)處于獨(dú)立種的分化中(speciation)。
　　 4.在已測定的中華白蛉微衛(wèi)星DNA的154個(gè)陽性克隆序列中，獲得有效的微衛(wèi)星DNA序列共118條。在此基礎(chǔ)上，選擇了22個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行多態(tài)性篩選，共獲得了多態(tài)的微衛(wèi)星DNA位點(diǎn)14個(gè)。同時(shí)，對其中的10個(gè)位點(diǎn)做了基因掃描，描述了各位點(diǎn)的基本特征。
　　 5.應(yīng)用mtDNA-Cytb基因和10個(gè)微衛(wèi)星DNA位點(diǎn)研究了中華白蛉的群體遺傳結(jié)構(gòu)，兩種分子標(biāo)志的研究結(jié)果均

6、顯示：來自河南群體的中華白蛉遺傳分化程度最高，陜西的兩個(gè)群體間FST為負(fù)值，其間差異極小，總體趨勢是基因流水平隨著地理距離的增大而減小，群體遺傳分布格局符合距離隔離模型。但基于Cytb基因序列的結(jié)果顯示基因流水平為0.0594，群體間分化水平高，其間遺傳差異程度與地理距離密切相關(guān)；基于微衛(wèi)星DNA的結(jié)果是群體間分化水平低，基因流為6.599，其間遺傳差異程度與種的分化密切相關(guān)，也與地理距離存在一定相關(guān)性。導(dǎo)致上述差異的原因是兩種分子標(biāo)志