中藥聯(lián)合膀胱灌注預(yù)防非肌層浸潤性膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)的療效觀察.pdf

1、研究目的:
　　1.整理張亞強老師治療膀胱癌經(jīng)驗;
　　2.觀察中醫(yī)辨證治療聯(lián)合膀胱灌注治療預(yù)防非肌層浸潤性膀胱癌術(shù)后1年復(fù)發(fā)率和2年復(fù)發(fā)率;
　　3.揭示扶正消癥湯對小鼠膀胱癌生長抑制作用和細(xì)胞免疫的影響。
　　研究方法:
　　本課題由三部分組成，首先是對導(dǎo)師張亞強老師治療膀胱癌的治療經(jīng)驗進(jìn)行整理總結(jié)。其次是對2014-10-08至2016-03-31期間至張亞強老師門診就診的膀胱癌患者跟蹤隨訪，分析其中

2、非肌層浸潤性膀胱癌患者1年復(fù)發(fā)率和2年復(fù)發(fā)率;最后是通過體內(nèi)研究觀察扶正消癥湯的抑瘤作用和對實驗動物細(xì)胞免疫的影響。
　　具體研究方法
　　1.臨床研究
　　1.1.病例收集
　　收集2014-10-08至2016-03-31期間于張亞強老師門診就診，接受中藥治療的非肌層浸潤性膀胱癌患者的病史資料，記錄患者每次門診的就診資料。
　　1.2.調(diào)查內(nèi)容
　　1.2.1.一般資料及病情信息:姓名、性別、年齡

3、、手術(shù)時間、手術(shù)方式、術(shù)后病理、膀胱灌注治療史、復(fù)發(fā)情況。
　　1.2.2.中醫(yī)治療信息:初次就診時間、服藥療程、接受中藥治療后復(fù)查結(jié)果、如有復(fù)發(fā)則收集復(fù)發(fā)病理結(jié)果。
　　2.實驗研究部分
　　2.1.建立Balb/c小鼠MB49細(xì)胞膀胱癌肩胛移植瘤動物模型，觀察移植瘤的生長趨勢，驗證模型的可行性;
　　2.2.制作扶正消癥湯中藥拌飼飼料，混合飼料飼喂荷瘤小鼠，觀察小鼠日進(jìn)食量，驗證中藥拌飼給藥的可行性;

4、　　2.3.將30只Balb/c小鼠接種MB49細(xì)胞懸液后，按體重隨機分為對照組、扶正消癥湯低劑量組和扶正消癥湯高劑量組，每組10只，雌雄各半。給予對照組常規(guī)鼠食，給予低劑量組含低劑量中藥混合飼料，給予高劑量組含高劑量中藥混合飼料。每日觀察小鼠體重、瘤徑、食重的變化。給藥15天后，將各組小鼠采用斷頸法處死，無菌條件下剝離原發(fā)瘤，稱重，計算小鼠腫瘤抑制率。腫瘤抑制率=對照組平均瘤重-實驗組平均瘤重/對照組平均瘤重×100％
　　2.

5、4.通過流式細(xì)胞技術(shù)，觀察扶正消癥湯給藥15天后對膀胱癌小鼠脾臟CD4+、CD8+的影響;
　　2.5.通過elispot檢測扶正消癥湯對膀胱癌小鼠脾臟淋巴細(xì)胞INF-γ分泌影響。
　　研究結(jié)果:
　　1.臨床研究結(jié)果
　　至隨訪結(jié)束，1年內(nèi)共有5名患者復(fù)發(fā)，1年以上至2年復(fù)發(fā)1例。中藥干預(yù)的膀胱癌患者術(shù)后1年復(fù)發(fā)率為8.2％，所有復(fù)發(fā)患者均為中高危，占所有已知中高?；颊撸?1例）的14.6％。由于僅有37例患者

6、觀察至2年，而在這37例患者中，有1人于1年內(nèi)復(fù)發(fā)，1人于2年內(nèi)復(fù)發(fā)，故2年復(fù)發(fā)率觀察為5.4％。
　　復(fù)發(fā)的6名患者，術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險均較大，其中中危2例，高危4例。中藥治療前復(fù)發(fā)患者2例。其中，距術(shù)后時間間隔最短為2.8月，最長為13.2月，平均復(fù)發(fā)時間為7.2月。中藥治療后復(fù)發(fā)截止隨訪最短時間為7.9月，最大為30.9月，平均時間為16.2月。
　　至隨訪期，有4名患者出現(xiàn)了復(fù)發(fā)（術(shù)后超過2年），其中3例分別于術(shù)后29.9

7、月、32.8月、80.1月復(fù)發(fā)，均行經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)，病理依次為高級別尿路上皮癌（原為低級別尿路上皮癌）、乳頭狀尿路上皮癌高級別（原為膀胱尿路上皮異形增生）1例術(shù)后病理為非浸潤性尿路上皮癌高級別（原為移行細(xì)胞癌Ⅱ-Ⅲ級）。另外1例之前病理為移行細(xì)胞癌Ⅱ-Ⅲ級，浸潤粘膜固有層，于86.3月后發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)，術(shù)后病理發(fā)展為肌層浸潤，隨后行膀胱全切加輸尿管皮膚造瘺術(shù)。
　　中藥干預(yù)前復(fù)發(fā)1次的患者中，復(fù)發(fā)時距原發(fā)時間最短6.4月，最長41

8、.9月。平均復(fù)發(fā)時間為17.4月。療后至隨訪時間無腫瘤生存平均時間為37月，其中最短14.3月，最長71月。
　　復(fù)發(fā)2次患者中，復(fù)發(fā)時距原發(fā)時間平均復(fù)發(fā)間隔為18.4月，其中最短6.1月，最長20.8月。服藥后至隨訪時間，無瘤生存平均時間44月，最短13月，最長82月。
　　2.體內(nèi)實驗研究結(jié)果
　　2.1.扶正消癥湯抑瘤作用結(jié)果
　　高劑量組瘤重0.81±0.17g，低劑量組瘤重0.91±0.15g，對照組瘤

9、重為1.04±0.30g。高劑量組瘤重最小為0.47g，最大值為1.10g;低劑量組瘤重最小值為0.72g，最大值為1.23g;對照組瘤重最小值為0.75g，最大值為1.65g。在瘤重上，高劑量組與對照組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，低劑量組與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，高劑量組與低劑量組比較亦無顯著性差異(P＞0.05)。高劑量組抑瘤率為22.3％，低劑量組抑瘤率為11.9％。
　　2.2.扶正消癥湯對膀胱癌小

10、鼠脾臟CD4+、CD8+的影響結(jié)果
　　對各組CD4+T細(xì)胞進(jìn)行比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。中藥高劑量組CD4+T為21.11±3.54，中藥低劑量組為21.06±4.86，對照組為22.74±3.45。
　　中藥高劑量組CD8+T細(xì)胞為7.14±1.46，中藥低劑量組為5.56±0.89，對照組為4.84±0.44。各組CD8+T淋巴細(xì)胞間，中藥高劑量組與對照組相較，高劑量組與低劑量組相較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義

11、(P＜0.05)。中藥低劑量組與對照組相較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　中藥高劑量組CD4+/CD8+為3.05±0.83，中藥低劑量組為4.06±1.58，對照組為4.79±1.19。中藥高劑量組和對照組相較，比值具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，高劑量組與低劑量組及低劑量組與對照組比值之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.3.扶正消癥湯對膀胱癌小鼠脾臟淋巴細(xì)胞INF-γ分泌影響
　　實驗孔斑點數(shù)

12、/陰性對照孔斑點數(shù)＞2為陽性結(jié)果，中藥高劑量組、低劑量組和對照組均表現(xiàn)為陽性。各組斑點數(shù)差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，表現(xiàn)出中藥高劑量組斑點數(shù)均值＞中藥低劑量組斑點數(shù)均值＞對照組斑點數(shù)均值。比較各組實驗組斑點數(shù)與陰性對照組的比值，發(fā)現(xiàn)中藥高劑量組與低劑量組之間，高劑量組與對照組之間均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，低劑量組與對照組之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　研究結(jié)論:
　　1.中藥能夠有效預(yù)防膀胱癌術(shù)后復(fù)