假單胞菌抗生素：吩嗪類化合物的檢測與藤黃綠菌素的土壤殘留分析.pdf

1、假單胞菌（Pseudomonas）是廣泛存在的一種革蘭氏陰性細(xì)菌，可生物合成藤黃綠菌素（Pyoluteorin，Plt）與多種吩嗪類化合物，如吩嗪-1-羧酸（Phenazine-1-Carboxylic Acid，PCA）、綠膿菌素（Pyocyanin，PYO）、1-羥基吩嗪（1-hydroxyphenazine，1-OH-PHZ）等，這些化合物都具有廣譜抑菌活性，對這些化合物的快速檢測有利于進(jìn)一步研究與監(jiān)控Plt與吩嗪類化合物的動(dòng)態(tài)合

2、成過程，但目前缺少一種快速、準(zhǔn)確、高靈敏度的檢測方法來同時(shí)檢測上述化合物。
　　本研究采用反相HPLC技術(shù)，以25 mM乙酸銨-乙腈為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，可快速檢測PCA、PYO、1-OH-PHZ與Plt等物質(zhì)，樣品最長保留時(shí)間為7.788 min、8.227 min、12.045 min和11.515 min。PCA、PYO、1-OH-PHZ與Plt在該方法下的最低檢出限分別為6.347 ng.mL-1、78.74 ng.mL-

3、1、9.173 ng.mL-1、117.2 ng.mL-1。同時(shí)利用該方法對熒光假單胞菌Pf-5、銅綠假單胞菌PAO1、綠針假單胞菌GP72與假單胞菌M18的發(fā)酵產(chǎn)物包括2-OH-PHZ、2-OH-PCA等，成功進(jìn)行了定量檢測，為吩嗪類化合物的合成途徑研究和新吩嗪類物質(zhì)的鑒定奠定良好的基礎(chǔ)。
　　假單胞菌抗生素中PCA與Plt是最具應(yīng)用價(jià)值的新型生物農(nóng)藥，具有抑制細(xì)菌、真菌、除草等功能，應(yīng)用前景廣闊。隨著現(xiàn)今社會(huì)對環(huán)境保護(hù)的重視程

4、度逐漸提高，土壤中農(nóng)藥殘留帶來的污染也引起廣泛關(guān)注。目前對PCA的土壤殘留分析已有報(bào)道，但Plt尚無此報(bào)道，因此建立一種能快速準(zhǔn)確地檢測土壤中Plt殘留的分析方法是十分必要的。
　　本研究利用超聲和索氏提取，建立了一種高效回收土壤中 Plt的方法。結(jié)果表明，土壤中的Plt濃度在0.05~0.5mg.kg-1之間時(shí)，回收率在78.25％~94.18%，達(dá)到農(nóng)藥殘留分析的要求。結(jié)合場放大樣品堆積毛細(xì)管電泳技術(shù)對Plt殘留進(jìn)行檢測，相比