低于抑制濃度的抗生素對銅綠假單胞菌基因表達的調(diào)節(jié).pdf

1、銅綠假單胞菌(.Pseudomonas aerugionsa)是一種機會致病菌，它可以在人群中引起嚴重的急性和慢性感染，是病人在醫(yī)院期間發(fā)生感染的第三大致病菌。許多抗生素對其具有一定的治療作用，但銅綠假單胞菌的一個重要特性是它對許多抗生素具有很高的內(nèi)在抗藥性，因此，篩選新的抗生素以及新的藥物靶點，是控制銅綠假單胞菌感染的有效途徑。 長期以來，由于抗生素所具有的天然的殺菌和抑菌作用，通常被用于治療各種細菌感染。但是，近期的一些研究

2、表明，低于抑制濃度的抗生素對許多基因的表達起著重要的調(diào)節(jié)作用。本研究以銅綠假單胞菌的13個分泌型毒性因子基因為對象，利用熒光素酶基因操縱子為報道子，研究了低于抑制濃度的萬古霉素、四環(huán)素、阿奇霉素和氨芐青霉素對基因表達的影響。 結(jié)果表明，13個分泌型毒性因子中的五個：rhlAB、phzA2、lasB、exoY和exoS，其表達同時被四種抗生素激活。phzAJ的表達被除氨芐青霉素之外的其它三種抗生素激活，同時產(chǎn)物綠膿菌素的產(chǎn)量增加，

3、這與先前關(guān)于低濃度抗生素可以降低細菌毒性的報道不同。對rhlAB基因的研究表明，其表達在1/4 MIC萬古霉素存在下提高了近10倍，產(chǎn)物鼠李糖脂的產(chǎn)量顯著提高，細胞叢動增強。四環(huán)素、阿奇霉素和氨芐青霉素也有類似的結(jié)果。這些結(jié)果表明，作為一種信號物質(zhì)，低濃度的抗生素對某些致病因子具有激活作用，從而對病原菌的致病過程有著重要而復雜的影響。 本研究同時用萬古霉素、氨芐青霉素、環(huán)丙沙星、多黏菌素、利福平、紅霉素、卡那霉素、氯霉素和四環(huán)素

4、九種抗生素對銅綠假單胞菌的隨機啟動子庫進行了檢測，對活性發(fā)生明顯改變的啟動子，通過PCR擴增、序列測定及與基因組序列的比對，確定了受調(diào)節(jié)的基因，同時檢測了不同種類抗生素對這些基因在固體培養(yǎng)基上的調(diào)節(jié)作用。通過對一個由32種化合物組成的小型化合物庫的初步檢測，明確了這些化合物對基因表達的影響。該方法為從中藥及其他天然成分中研究開發(fā)新型抗致病藥物，提供了一個可行的技術(shù)平臺。在用低于抑制濃度的抗生素對啟動子庫檢測的過程中，發(fā)現(xiàn)了一個受調(diào)節(jié)的潛