銅綠假單胞菌的耐藥性及對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥相關(guān)基因的研究.pdf

1、目的：銅綠假單胞菌是醫(yī)院常見的病原菌，由銅綠假單胞菌引起的肺炎病死率極高。近年來，銅綠假單胞菌的耐藥率在不斷增加，已經(jīng)出現(xiàn)對三代頭孢菌素和亞胺培南耐藥的菌株，給臨床治療帶來很大困難。研究發(fā)現(xiàn)，銅綠假單胞菌產(chǎn)生的各種β-內(nèi)酰胺酶(如TEM、SHV、OXA、PER、VER、GES、CARA)、金屬β-內(nèi)酰胺酶(如IMP、VIM、SPM、GIM)和質(zhì)粒頭孢菌素酶(如DHA)以及外膜孔蛋白D2(OprD2)缺失，是對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的主要

2、機(jī)制。為了解本地區(qū)臨床分離的銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥情況及機(jī)制，以便為臨床選擇用藥提供依據(jù)而進(jìn)行了研究。 方法：2006年2月-2007年8月間，從該院住院患者分離出了160株銅綠假單胞菌。采用K-B紙片法，用17種抗生素對分離菌株進(jìn)行藥敏試驗；對其中抗三種以上β-內(nèi)酰胺類抗生素的75株菌用PCR方法擴(kuò)增TEM、SHV、OXA、PER、GES、IMP、VIM、DHA和OprD29種β-內(nèi)酰胺酶耐藥基因；對1株多重耐

3、藥的銅綠假單胞菌GES基因、另1株的PER基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行了測序，并將測序結(jié)果與GenBank登錄的結(jié)果進(jìn)行了比對。 結(jié)果： ①在160株銅綠假單胞菌篩選出對三種以上β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥菌75株(46.9％，75/160)。 ②分析銅綠假單胞菌對17種抗生素的敏感性試驗，可見臨床分離株對美羅培南敏感性最高為85.3％，對頭孢西丁、哌拉西林/他巴唑坦、阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南、替卡西林/克拉維酸

4、敏感率均超過70％，對環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、頭孢曲松耐藥率高，敏感率分別是17.3％、18.7％、25.3％。 ③在檢測的9種耐藥相關(guān)基因中，發(fā)現(xiàn)了7種耐藥基因，其中25％菌株檢測到2種耐藥基因。 ④對1株菌的GES基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物序列分析發(fā)現(xiàn)與GenBank登錄的序列有4個位點不同。另對26號菌株的PER基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物序列分析發(fā)現(xiàn)與GenBank登錄的序列完全相同。 結(jié)論： ①在該院分離的銅綠假單

5、胞菌中對β-內(nèi)酰胺類抗生素有很高的多重耐藥率。 ②銅綠假單胞菌對抗生素美羅培南、頭孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星比較敏感，但仍有部分菌株耐藥。復(fù)方新諾明、頭孢曲松、左氧氟沙星和環(huán)丙沙星在臨床上治療銅綠假單胞菌感染已沒有應(yīng)用價值。 ③銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素的多重耐藥是由多種耐藥基因決定的，提示該菌具有復(fù)雜的耐藥機(jī)制。 ④對1株銅綠假單胞菌GES耐藥基因測序，發(fā)現(xiàn)部分基因位點發(fā)生了變異。提示耐藥基因的

6、變異可能是耐藥的機(jī)制之一。 P.aeruginosa廣泛分布于自然界，是醫(yī)院感染最常見的病原菌，在臨床抗感染治療過程中容易對抗生素產(chǎn)生耐藥性，且耐藥機(jī)制復(fù)雜，目前，用于治療P.aeruginosa的抗生素有β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、氟喹諾酮類。同時，由于頭孢菌素廣泛應(yīng)用，出現(xiàn)了大量耐藥菌株。對于病因未明的嚴(yán)重感染、混合感染、免疫功能低下合并感染，可采用抗生素聯(lián)合治療，以擴(kuò)大抗菌譜，增強(qiáng)抗菌活性，減輕不良反應(yīng)及耐藥性的產(chǎn)生。總之，