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1、目的:建立異丙酚生物樣品在線前處理系統(tǒng)及分析方法。
方法:
1.利用兩相溶劑體系在螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單向性流體動(dòng)力學(xué)平衡,建立毛細(xì)管微萃取的異丙酚生物樣品在線前處理方法,并對(duì)毛細(xì)管微萃取系統(tǒng)進(jìn)行影響因素的考察。并將毛細(xì)管微萃取系統(tǒng)與熒光光譜法結(jié)合用于測(cè)定生物樣品中異丙酚含量。
2.將毛細(xì)管微萃取系統(tǒng)與光纖傳感紫外分光光度法結(jié)合用于測(cè)定生物樣品中異丙酚的含量。
3.將毛細(xì)管微萃取系統(tǒng)與光纖傳感
2、微順序注射-閥上實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)(Micro Sequential Injection lab-on-valve,μSIA-LOV)結(jié)合,并用于異丙酚的衍生化實(shí)驗(yàn)。
結(jié)果:
1.毛細(xì)管微萃取結(jié)合熒光光譜法測(cè)定全血中異丙酚含量的實(shí)驗(yàn):以熒光強(qiáng)度為主要考察指標(biāo),毛細(xì)管微萃取系統(tǒng)最佳萃取條件分別為:毛細(xì)管的最佳長(zhǎng)度為1.00m,最優(yōu)直徑為0.762mm,最佳打出流速為50μL/s,在毛細(xì)管中最優(yōu)停留時(shí)間為1.0min,最佳靜置時(shí)
3、間是1.0min,選用5.0mL的環(huán)己烷做萃取劑,1.0mL的甲醇做蛋白沉淀劑。異丙酚的血藥濃度在0.05~10.0μg/mL內(nèi)線性良好(r=0.9958);高(7.5μg/mL)、中(2.5μg/mL)、低(0.25μg/mL)3個(gè)濃度的平均提取回收率平均在92.34%~96.33%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均<10%;日內(nèi)、日間RSD均<15%。
2.毛細(xì)管微萃取系統(tǒng)結(jié)合光纖傳感紫外分光光度法測(cè)定生物樣品中異丙酚含量的實(shí)
4、驗(yàn):異丙酚的血藥濃度在16.0~60.0μg/mL內(nèi)線性良好(r=0.9988),定量限為16.0μg/mL;低(20.0μg/mL)、中(30.0μg/mL)、高(60.0μg/mL)3個(gè)濃度的提取回收率均在91.4%~95.38%之間,低、中、高3個(gè)濃度的平均日內(nèi)精密度RSD分別為8.70%﹑8.60%和4.60%,平均日間精密度RSD分別為10.10%﹑8.20%和5.10%。
3.異丙酚在毛細(xì)管微萃取-光纖傳感微順序注
5、射-閥上實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)上衍生化實(shí)驗(yàn):異丙酚血藥濃度在3.0~18.0μg/mL內(nèi)線性良好(r=0.9975),定量限為3.0μg/mL;低、中、高3個(gè)濃度(6.0,12.0,18.0μg/mL)的日內(nèi)精密度RSD分別為6.8%﹑6.5%和10.7%,日間精密度RSD分別為5.7%﹑8.8%和6.8%,平均回收率在91.0%~97.8%之間。
結(jié)論:
1.毛細(xì)管微萃取方法作為樣品前處理技術(shù)更加方便、簡(jiǎn)單、省時(shí)省力,并且該系
6、統(tǒng)可以用軟件控制自動(dòng)完成,為異丙酚在線前處理提供了一種新方法。
2.毛細(xì)管微萃取系統(tǒng)結(jié)合熒光光譜法測(cè)定全血樣品中異丙酚含量,方法簡(jiǎn)單,靈敏度高還可以排除全血中雜質(zhì)的干擾。
3.毛細(xì)管微萃取系統(tǒng)結(jié)合光纖傳感紫外分光光度法測(cè)定全血樣品中異丙酚含量,檢測(cè)時(shí)間短,樣品用量少。為異丙酚血藥濃度在線檢測(cè)提供了可能性。
4.將異丙酚在毛細(xì)管微萃取-光纖傳感微順序注射-閥上實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)衍生化,大大提高了檢測(cè)的靈敏度,而且,通
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