針刺調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶網(wǎng)絡(luò)延長腦梗死溶栓時間窗的研究.pdf

1、目的:觀察醒腦開竅針刺法延長腦梗死溶栓時間窗的效應(yīng);探討醒腦開竅針刺法對缺血再灌注損傷的腦保護作用的可能機制。
　　方法:將SD大鼠分為假手術(shù)組、模型組、溶栓組、針刺+溶栓組（針刺組）、藥物+溶栓組（對照組），以自體血栓栓塞法制作局灶性腦缺血大鼠模型，rt-PA為溶栓手段，以“醒腦開竅”針刺法為干預(yù)手段，觀察針刺干預(yù)對大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分、腦梗死容積百分比、腦含水量、腦出血量以及血腦屏障通透性的影響;在此基礎(chǔ)上，同時運用Real-t

2、ime PCR和Western blot方法分別檢測各組大鼠皮層中炎性因子TNF-α、IL-1β、ICAM-1的mRNA及蛋白表達情況;并運用明膠酶譜法檢測MMP-2、MMP-9活性變化，最后運用Western blot方法檢測緊密連接相關(guān)蛋白ZO-1、occludin的表達，以探討針刺調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶網(wǎng)絡(luò)的作用機制。
　　結(jié)果:1、針刺延長腦梗死溶栓時間窗的效應(yīng)研究
　　溶栓治療后腦梗死大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分、腦含水量、腦出

3、血量以及血腦屏障通透性隨著溶栓時間的延長而增加(P＜0.05);溶栓治療后腦梗死容積百分比與治療前相比并無明顯變化(P＞0.05);針刺以及抑制劑干預(yù)均能降低神經(jīng)行為學(xué)評分，減少腦梗死體積、腦含水量以及腦出血量，穩(wěn)定血腦屏障通透性(P＜0.05);相比抑制劑，針刺在降低神經(jīng)行為學(xué)評分、減少腦出血量以及穩(wěn)定血腦屏障通透性上更具優(yōu)勢(P＜0.05);在減少腦梗死體積以及腦含水量上兩者無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2、針刺延長腦梗

4、死溶栓時間窗的機制研究
　　(1)炎性因子的mRNA及蛋白表達:溶栓治療后腦梗死大鼠TNF-α、IL-1β以及ICAM-1的mRNA及蛋白表達均升高(P＜0.05);針刺和抑制劑干預(yù)均能降低這三種炎性因子的mRNA及蛋白表達(P＜0.05);相比抑制劑，針刺在降低ICAM-1的mRNA及蛋白表達上更具優(yōu)勢(P＜0.05);而在降低TNF-α、IL-1β的mRNA及蛋白表達上二者無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　(2)基質(zhì)金

5、屬蛋白酶活性:溶栓前后比較MMP-2和MMP-9差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);針刺和抑制劑能降低溶栓后MMP-9活性，且針刺效應(yīng)大于抑制劑效應(yīng)(P＜0.05);針刺和抑制劑在降低MMP-2活性上與溶栓組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)
　　(3)緊密連接蛋白表達:溶栓治療后腦梗死大鼠ZO-1和occludin的蛋白表達隨著溶栓時間的延長而降低(P＜0.05);針刺和抑制劑均能提高溶栓后腦梗死大鼠ZO-1和occludin

6、的蛋白表達(P＜0.05);相比抑制劑，針刺提高溶栓后腦梗死大鼠ZO-1和occludin的蛋白表達更為顯著（P＜0.05）。
　　結(jié)論:大鼠腦缺血后溶栓治療受到時間窗的嚴(yán)格限制，超過時間窗溶栓會導(dǎo)致神經(jīng)功能損傷、血腦屏障改變以及出血性轉(zhuǎn)化，且這些影響隨著溶栓時間的延長而加重。醒腦開竅針刺法和MMPs廣譜抑制劑強力霉素均可通過改善腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能損傷、減少溶栓治療后血腦屏障通透性改變以及出血性轉(zhuǎn)化來實現(xiàn)延長腦梗死溶栓時間窗